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【6h】

应用蛋白质组学技术建立Behcet病相关葡萄膜炎诊断模型并筛选血清学标记物

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引言

第一部分: 建立Behcet’s病相关葡萄膜炎诊断模型

一、实验材料与方法

1.病例来源及入选标准

2.实验方法

二、实验结果

第二部分:筛选Behcet’s病相关葡萄膜炎活动期的血清学标记物

一、实验材料与方法

1.病例来源及入选标准

2.实验方法

二、实验结果

讨论

结语

参考文献

综述

参考文献

致谢

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摘要

目的:应用蛋白质组学技术建立Behcet病相关葡萄膜炎诊断模型并筛选血清学标记物。
   方法:152例血清样本包括Behcet病相关葡萄膜炎活动期、缓解期、小柳原田病(VKH)各31例及59例正常对照,所有样本同批进行MALDI-TOF-MS结合蛋白质芯片分析并绘制蛋白指纹图谱;应用BPS软件建立诊断模型并进行独立样本验证;应用磁珠结合、电泳及质谱技术分离、纯化和鉴定差异蛋白;应用ELISA和免疫沉淀技术验证所得蛋白质。
   结果:1)在质荷比1000-50000m/z范围内将Behcet病相关葡萄膜炎同VKH及正常对照相比较,建立Behcet病相关葡萄膜炎血清蛋白质组学诊断模型,经独立验证敏感性为84.62%,特异性为90.91%。2)6个蛋白峰(M1711.82、M8688.13、M11490.3、M11548.2、M39478.0和M58518.8)在Behcet病相关葡萄膜炎活动期与缓解期患者中有表达差异(p<0.05);其中M1711.82和M8688.13在活动期表达低于缓解期,M11490.3、M11548.2、M39478.0和M58518.8高于缓解期;经分离、纯化、鉴定后并通过ELISA和免疫沉淀验证,M11490.3和M11548.2为血清淀粉样蛋白A(SetumAmyloid A,SAA),M39478.0为载月旨蛋白A1(Apolipoprotein A1,ApoA1)。
   结论:应用蛋白质组学技术建立了Behcet病相关葡萄膜炎血清蛋白质组学诊断模型,并筛选出血清淀粉样蛋白A和载脂蛋白A1作为Behcet病相关葡萄膜炎活动期的血清学标记物。

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