第一部分4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素及其与格尔德霉素生物合成PKS后修饰的关系;第二部分必特螺旋霉素生物合成调节基因acyB2在大肠杆菌中的异源表达

摘要

第一部分:4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素及其与格尔德霉素生物合成PKS后修饰的关系
　　 格尔德霉素(geldanamycin，GDM)是一种苯（醌型）安莎类抗生素，是分子伴侣热休克蛋白90(Hsp90)的特异性抑制剂，具有抗肿瘤和抗病毒等生物学活性。但是，GDM具有严重的肝脏毒性，且水溶性和光稳定性较差，限制其开发成为药物，因此，它只作为一个重要的抗肿瘤药物开发先导化合物。近年来，寻找水溶性好、肝毒性低的格尔德霉素衍生物成为新的研究热点。
　　 本文通过对吸水链霉菌17997格尔德霉素生物合成PKS后修饰gdmNˉ（编码氨甲酰基转移酶）变株的次级代谢产物分析，发现了一个预期的新格尔德霉素衍生物,4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素。gdmNˉ变株发酵上清液乙酸乙酯提取后，进行硅胶板TLC分析；对一个红色目标化合物进行HPLC和高分辨质谱分析，并对其进行了1H-和13C-核磁共振分析；对红色目标化合物在吸水链霉菌17997格尔德霉素PKS基因阻断变株中进行了生物转化实验。
　　 结果：显示：在gdmNˉ变株发酵产物中发现了1个预期的红色目标化合物（4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素）：该化合物可被格尔德霉素生物合成PKS后修饰系统7-O-氨甲酰化，生成4,5-双氢-19-S-甲基格尔德霉素，但不能C-4,5氧化。
　　 4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素的发现，以及早期发现的19-S-甲基格尔德霉素和4,5-双氢-19-S-甲基格尔德霉素，加深了对天然存在于吸水链霉菌17997格尔德霉素生物合成PKS后修饰系统以外修饰的认识。通过分析生物转化产物，证实19-S-甲基化修饰对格尔德霉素生物合成PKS后修饰系统中的氨甲酰基化没有影响，而对C-4,5氧化具有抑制作用。
　　 第二部分:必特螺旋霉素生物合成调节基因acyB2在大肠杆菌中的异源表达
　　 必特螺旋霉素是由基因工程重组菌StreptomycesspiramyceticusWSJ-1产生的一组以4