Alpha-internexin对胰岛素瘤良恶性的鉴别和预后的判断&转录因子MafAPDX-1与胰岛素瘤细胞合成胰岛素的关系

摘要

目的:明确α-internexin在胰岛素瘤中的表达及其调控机制;探讨α-internexin是否可作为分子标志物用于鉴别胰岛素瘤的良恶性和判断预后。
　　 实验方法:用免疫组织化学染色方法检测165个胰岛素瘤的α-internexin的表达，并随访其中的102例患者。应用单因素及多因素统计分析胰岛素瘤中α-internexin的表达与临床病理特征及患者预后的相关性。用DHPLC定量检测α-internexin启动子区的甲基化状态。应用Mann-Whitney U非参数检验分析甲基化与蛋白表达的相关性。
　　 结果:165个胰岛素瘤有122例(73.9％)表达α-internexin蛋白，109个瘤旁胰腺组织均未见该蛋白表达(P=1.86×10-33)。145个良性胰岛素瘤中有115例(75.3％)表达α-internexin蛋白，而20个恶性胰岛素瘤中7例(35％)表达α-internexin蛋白(P=2.32×10-5)。α-internexin的表达率下降与胰岛素瘤发生转移显著相关(78.8％vs.35.3％，P=3.94×10-4)同时和预后差相关(75.6％ vs.22.2％，P=0.002)。此外α-internexin在胰岛素瘤中的表达率下降还与年龄偏大及肿瘤发生在胰头部相关(P=0.04，0.015)，而与性别、肿瘤大小不相关。Kaplan-Meier生存分析显示α-internexin蛋白表达率下降的患者的总生存时间以及无病生存时间均短于α-internexin蛋白表达的患者(P=0.053，0.016)，但COX回归生存分析显示α-internexin蛋白的表达不是胰岛素瘤患者预后的独立相关指标。胰岛素瘤中，α-internexin启动子区（-149～+113）的低甲基化与其蛋白表达密切相关(P=0.008)。
　　 结论:α-internexin蛋白可能是新的鉴别胰岛素瘤良恶性的分子标志物，但不能明确可否判断患者预后。α-internexin启动子甲基化是调控胰岛素瘤中α-internexin表达的分子调控机制。
　　 目的:测定MafA和PDX-1在胰岛素瘤组织中的表达并探讨二者与胰岛素瘤细胞合成胰岛素的关系。
　　 方法:用免疫组化染色检测49个胰岛素瘤及其30个配对瘤旁胰腺、5个正常胰腺组织中胰岛素、MafA和PDX-1的表达;同时选择6个非胰岛素瘤胰腺内分泌肿瘤（胃泌素瘤、胰高血糖素瘤、无功能胰腺内分泌肿瘤各两例）做为对照，测定组织中胰岛素、MafA、PDX-1及各类肿瘤所分泌的激素。用免疫荧光双染色的方法对胰岛素瘤、瘤旁胰岛及正常胰岛中胰岛素、MafA和PDX-1的表达共定位，通过激光共聚焦扫描和图像分析处理获得细胞的荧光强度。应用Spearman秩相关分析瘤细胞内MafA与胰岛素、PDX-1与胰岛素荧光强度的相关性。非参数检验分析肿瘤组织和瘤旁胰岛之间的细胞荧光强度的差别，P≦0.05为显著差异。
　　 结果:49个胰岛素瘤组织中胰岛素表达阳性44例(90％)，胰岛素表达阴性5例(10％)。在胰岛素表达阳性的肿瘤中MafA阳性率为93％(42/44)，而胰岛素表达阴性的肿瘤中未见MafA表达，MafA与INS的表达显著相关(P=1.10×10-5)。在胰岛素表达阳性的肿瘤中PDX-1阳性率为86％(38/43)，而胰岛素表达阴性的5个肿瘤中未见PDX-1表达，PDX-1与胰岛素的表达显著相关(P=1.47×10-4)。胰岛素、MafA和PDX-1表达全部阳性的胰岛素瘤有38个，表达全部阴性5个。2个胃泌素瘤胃泌素染色阳性，2个胰高血糖素瘤胰高血糖素染色阳性。6个非胰岛素瘤均未见胰岛素染色阳性，并且MafA和PDX-1染色均阴性，间接支持了MafA、PDX-1与胰岛素合成密切相关而且特异。免疫荧光双染色经激光共聚焦扫描发现在绝大多数的胰岛素瘤细胞、瘤旁胰岛β细胞及正常胰岛的β细胞中，MafA与胰岛素共存且MafA与胰岛素的荧光强度均显著正相关(瘤细胞:r=0.737，P=2.012×10-200;瘤旁胰岛β细胞:r=0.565，P=8.0×10-49，正常胰岛β细胞:r=0.717，P=1.01×10-42)。与此类似，在绝大多数的胰岛素瘤细胞中PDX-1与胰岛素共存且二者的荧光强度显著正相关(r=0.701，P=9.89×10-45)。胰岛素瘤细胞中胰岛素的荧光强度显著低于瘤旁胰岛β细胞(P=8.55×10-18)，但二者的MafA荧光强度无差别(P=0.545)。
　　 结论:胰岛素瘤中MafA、PDX-1广泛表达且与胰岛素的合成密切相关。

目录

第一部分 Alphα-internexin 对胰岛素瘤良恶性的鉴别和预后的判断

摘要

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

结论

参考文献

第二部分 转录因子MafA和PDX-1与胰岛素瘤细胞合成胰岛素的关系

摘要

前言

实验材料

实验方法

实验结果

讨论

小结

参考文献

论文综述

致谢

声明