大气PM2.5对大鼠胰岛素瘤细胞凋亡及胰岛素分泌的影响

摘要

目的 探讨PM2.5对大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)凋亡及胰岛素分泌的影响.方法 采集并收集大气中PM2.5,用INS-1细胞建立细胞模型,用含不同浓度(200、20、2、0μg·mL-1)PM2.5的培养基染毒,四甲基偶氮唑盐(MTT)细胞毒性实验检测不同浓度PM2.5对INS-1细胞活率的影响;葡萄糖刺激的胰岛素分泌实验(GSIS)检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞胰岛素分泌的影响;2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)做为荧光探针检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞活性氧(ROS)生成的影响;流式细胞Annexin V-FITC/PI双染法检测不同浓度PM2.5染毒对INS-1细胞凋亡率的影响.结果 MTT实验结果显示:与0μg·mL-1组比较,PM2.5染毒INS-1细胞24 h,20、200μg·mL-1 PM2.5组INS-1细胞活率均降低(P均<0.05);当PM2.5染毒INS-1细胞48 h和72 h时,2、20、200μg·mL-1组的INS-1细胞存活率均降低(P均<0.05).GSIS实验结果显示:在基础葡萄糖浓度(5.6 mmol·L-1)和高浓度葡萄糖(16.7 mmol·L-1)刺激下,200μg·mL-1组胰岛素分泌水平低于0μg·mL-1组(P<0.05).ROS含量检测实验结果显示:200μg·mL-1组INS-1细胞内ROS含量高于0μg·mL-1组(P<0.05).流式细胞术实验结果显示:与0μg·mL-1组比较,2、20、200μg·mL-1组细胞晚期凋亡率均升高,20、200μg·mL-1组细胞总凋亡率均升高(P均<0.05).结论 PM2.5可使INS-1细胞活力降低,胰岛素分泌水平降低,可能与ROS水平增高、进而诱导了INS-1细胞凋亡有关.