CXCR3在原发性胆汁性肝硬化中对CD8+T细胞作用的研究

摘要

目的：通过血清趋化因子水平、细胞表面受体表达水平与细胞核内基因mRNA水平三个层面研究CXCR3及其配体在PBC的发病中对T淋巴细胞，尤其是CD8+T细胞迁徙至肝脏过程中发挥的作用，以进一步证明CXCR3在PBC中的重要性，探索其致病机制。 方法：第一部分血清趋化因子水平:31例PBC患者，21例碱性磷酸酶升高，10例碱性磷酸酶在正常范围，7例疾病对照（慢性乙型肝炎），13例健康对照采用流式细胞微球(Cytometric Bead Array，CBA)蛋白定量技术定量检测外周血清中CXCR33种配体含量，包括MIG(CXCL9)、IP-10(CXCL10)及I-TAC(CXCL11);第二部分细胞表面受体表达水平:12例PBC患者，10例碱性磷酸酶升高，2例碱性磷酸酶在正常范围，7例疾病对照，13例健康对照采用流式细胞(flowcytometry，FCM)免疫荧光法检测外周血淋巴细胞中CD8+T细胞比例及总淋巴细胞、CD8+T细胞表面CXCR3的表达量，用平均荧光强度计算;第三部分9例PBC患者，8例碱性磷酸酶升高，1例碱性磷酸酶在正常范围，7例疾病对照，9例健康对照采用实时聚合酶链式反应（real-time PCR）法检测外周血CD8+T细胞CXCR3基因的mRNA相对于内参基因GAPDH的表达量。 结果：第一部分CXCR3的3种配体在血清中的浓度PBC组较疾病对照组及健康对照组均显著升高，P值分别PMIG-DC=0.002，PMIG-HC＜0.001，PIP-10-DC=0.011，PIP-10-HC＜0.001，PI-TAC-DC=0.006，PI-TAC-HC＜0.001，两对照组间3指标均无差异。另外，3种配体在ALP升高与ALP正常的PBC患者间无差别，P值分别为0.451，0.863，0.089。第二部分PBC患者组、疾病对照组与健康对照组的CD8+细胞比例无差别。PBC患者淋巴细胞CXCR3表达量显著高于两组对照，P值分别为0.006和0.024。更进一步的，PBC患者CD8+淋巴细胞CXCR3表达量显著高于两组对照，P值分别为0.007和0.039。第三部分PBC患者与疾病对照、健康对照CD8+细胞CXCR3mRNA相对表达量不存在统计学差异。 结论：PBC患者外周血清中CXCR3的3种配体浓度均较疾病对照及健康对照明显升高，但与碱性磷酸酶水平无关。CXCR3在PBC患者外周血淋巴细胞、CD8+T细胞表达量均较两组对照显著升高，CXCR3对CD8+T细胞存在趋化作用。但PBC患者及对照CD8+T细胞mRNA中CXCR3的相对表达量无统计学差异，提示可能存在转录后的调控机制。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 研究对象

2 主要仪器和试剂

3 实验方法

4 统计学分析

结果

1 流式细胞微球(Cytometric Bead Array，CBA)蛋白定量技术定量检测外周血清中CXCR3配体含量

2 流式细胞(flow cytometry，FCM)免疫荧光法检测外周血淋巴细胞及CD8+T细胞表面CXCR3表达量

3 实时聚合酶链式反应(real-time PCR)法检测外周血CD8+T细胞CXCR3基因的mRNA相对表达量

讨论

结论

参考文献

文献综述 CXCR3与自身免疫病

致谢

附录：英文缩略词表

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