POEMS综合征患者高水平血清血管内皮生长因子的细胞来源及产生机制

摘要

目的:
　　POEMS综合征是一种少见的单克隆浆细胞增殖性疾病，主要临床特点包括多发周围神经病、硬化性骨病和水负荷异常等。血管内皮生长因子(VEGF)，作为一种调控血管新生和增强血管通透性的重要细胞因子，是该病诊断、病情监测和疗效评价的核心分子标志物。但是，目前关于POEMS综合征患者高水平血清VEGF的具体细胞来源，及其产生调控机制还缺乏系统的研究。
　　材料与方法:
　　收集2014年2月至2015年4月就诊于北京协和医院的62例初治及46例其间完成治疗的POEMS综合征患者临床资料、血清和骨髓标本。采用ELISA法测定血清VEGF水平。通过实时荧光定量PCR和流式细胞学，分别在mRNA和蛋白水平测定骨髓内浆细胞表达VEGF的相对水平，并和血清VEGF水平进行相关性分析。利用流式细胞学，对骨髓内浆细胞亚群进行分析，并测定不同亚群细胞表达VEGF和白介素-6(IL-6)的水平。应用免疫组织化学法，检测患者骨髓活检组织中浆细胞分布、克隆性和VEGF及相关调控分子，包括IL-6和缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)的表达情况。采用SPSS22软件进行统计分析，当p＜0.05时认为存在统计学差异。
　　结果:
　　初治POEMS综合征患者血清VEGF水平（中位值5958 pg/mL），显著高于其他疾病和健康对照(p＜0.001)，具有明确的诊断价值(受试者工作曲线下面积0.988，p＜0.001)，当选取2000 pg/mL作为临界值时，其诊断的特异性和敏感性分别为97.7％和91.9％。随治疗进行，血清VEGF水平逐渐下降（6程治疗后，中位值1184pg/mL，p＜0.001;12程治疗后，中位值832 pg/mL，p＜0.001）。POEMS综合征患者骨髓内浆细胞VEGF在mRNA和蛋白水平上均高于对照，且随治疗逐步下降。重要的是，骨髓内浆细胞VEGF水平和血清VEGF水平有显著相关性（初治，rho=0.33，p=0.01;治疗后，rho=0.53，p＜0.001）。在62例初治POEMS综合征患者中，51例经骨髓流式细胞学未检测到单克隆浆细胞，仅存在多克隆浆细胞。另11例患者(18％)，骨髓中同时检测到单克隆和多克隆浆细胞，数量上以后者较多(41％vs.59％)。单克隆浆细胞VEGF水平与多克隆浆细胞类似(平均荧光强度2009 vs.2367，p=0.594)，但IL-6水平显著高于后者（平均荧光强度1635 vs.865，p=0.006）。在46例骨髓活检组织中，POEMS综合征患者浆细胞呈现散在分布（25例，54％）或散在伴灶性分布（21例，46％）两种形式。其中散在浆细胞为多克隆，而灶性区域内同时存在单克隆和多克隆浆细胞，两者均表达VEGF和HIF-1α，而IL-6则主要为单克隆浆细胞表达。
　　结论
　　POEMS综合征患者骨髓内浆细胞是VEGF的主要来源。其中，单克隆浆细胞可能通过旁分泌IL-6，刺激多克隆浆细胞增生、产生VEGF。

目录

摘要

第一部分：POEMS综合征患者高水平血清血管内皮生长因子的细胞来源及产生机制

引言

材料与方法

一、研究对象

二、主要试剂

三、主要设备器材

四、实验方法

结果

第一部分：POEMS综合征患者血清VEGF水平测定

第二部分：POEMS综合征患者骨髓浆细胞表达VEGF测定

第三部分：POEMS综合征患者骨髓内浆细胞的克隆性分析

讨论

结论

参考文献

第二部分：文献综述 POEMS综合征的发病机制

附录

致谢

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