芒柄花素上调Sirt1激活Nrf2/ARE信号通路改善糖尿病肾病机制研究

目录

声明

摘要

引言

第一章文献研究

1．1现代医学治疗糖尿病肾病的研究现状

1．1．1DN的研究现状

1．1．2Sirt1在DN相关领域的研究

1．1．3Nrf2/ARE信号通路在DN相关领域的研究

1．2中医药治疗DN的研究现状

1．2．1中医在DN相关领域的研究

1．2．2芒柄花素在DN相关领域的研究

第二章芒柄花素改善糖尿病小鼠的肾脏功能与肾脏纤维化

2．1仪器与试剂

2．1．1试剂

2．1．2仪器

2．1．3试剂配制

2．2实验方法

2．2．1实验动物

2．2．2实验设施

2．2．3给药方法与动物分组

2．2．4动物饲料

2．2．5动物生化指标采集

2．2．6免疫组化

2．2．7PAS染色

2．2．8Masson染色

2．2．9HE染色

2．2．10Western Blotting

2．2．11统计分析

2．3实验结果

2．3．2芒柄花素对于db/db糖尿病鼠体重及各项血液生化指标的影响

2．3．3对各组小鼠肾脏病理形态学的影响

2．3．4芒柄花素对各组小鼠肾脏组织中COLI、COLIII和α—SMA蛋白表达的影响

2．3．5芒柄花素对db/db小鼠肾脏FN、Icam-1、Nrf2、Sirt1等蛋白表达的影响

2．4实验讨论

2．5实验小结

第三章芒柄花素通过上调Sirt1激活Nrf2/ARE信号通路，逆转高糖诱导的GMCs中FN与Icacm-1的高表达

3．1仪器与试剂

3．1．1试剂

3．1．2仪器

3．1．3试剂配制

3．2实验方法

3．2．1大鼠肾小球系膜细胞原代培养与传代

3．2．2MTT

3．2．3超氧化物阴离子检测

3．2．4Western Blotting

3．2．5核蛋白提取

3．2．6考马斯亮蓝法核蛋白定量

3．2．7免疫荧光

3．2．8小分子RNA干扰

3．3．1芒柄花素能抑制高糖诱导的GMCs中FN、Icam-1蛋白水平，降低ROS水平

3．3．2芒柄花素能激活Nrf2/ARE通路，增加Nrf2的核内表达量

3．3．3芒柄花素可以增加Sirt1的表达

3．3．4干扰Sirt1可以抑制芒柄花素对于Nrf2/ARE通路的激活

3．3．5干扰Sirt1可以抑制芒柄花素对纤维化指标的改善作用与对氧化应激的抵抗作用

3．4实验讨论

3．5实验小结

结语

参考文献

附录

在校期间发表论文情况

致谢