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致谢
第一部分文献综述
一、葡萄糖异构酶及其蛋白质工程
(一)葡萄糖异构酶简介
(二)葡萄糖异构酶的来源及性质
(三)葡萄糖异构酶的作用机理
(四)改善葡萄糖异构酶的蛋白质工程
二、同源重组技术
(一)同源重组的分子模型
(二)同源重组的酶学机制
(三)同源重组技术的发展阶段
(四)同源重组技术的新策略
(五)同源重组技术要点
(六)同源重组技术的应用
(七)前景与展望
三、链霉菌中的同源重组
(一)链霉菌简介
(二)链霉菌同源重组的载体系统
(三)链霉菌同源重组中的负选择标记
(四)线形DNA片段的同源重组
第二部分研究报告
一、前言
二、重组路线一：插入整合——自发回复
(一)路线一的重组过程示意图
(二)插入型同源重组质粒pXW的构建
(三)通过插入整合获得链霉菌M1033的GI缺陷型菌株
(四)第一步重组菌株的自发回复
三、重组路线二：两步基因置换
(一)路线二的重组过程示意图
(二)置换型同源重组质粒pTR的构建
(三)通过第一步基因置换获得链霉菌M1033的GI缺陷型菌株
(四)第二步基因置换的尝试
四、重组路线三：一步基因置换
(一) 路线三的重组过程示意图
(二) 一步置换型同源重组质粒pUT的构建
(三) 一步基因置换
五、三种重组路线的比较与将来工作的设想
第三部分材料与方法
第四部分参考文献
附录1.重组质粒pUB1-GI2的限制酶切图谱
附录2.同源重组载体pDH5的限制酶切图谱
附录3.部分学术论文汇编(摘要)
