DNA光解酶的辅基结合及其与酶的热稳定性和活性的关系

摘要

DNA在紫外线诱导下会产生损伤，这种损伤会导致生物体生长迟缓、诱发突变甚至死亡。DNA光解酶可以吸收300-500nm的光子的能量来修复这种损伤。大肠杆菌光解酶含有两个辅基，分别为黄素腺嘌呤二核苷酸和次甲基四氢叶酸。FAD为活性催化所必需，其生理状态是还原态的。MTHF则具有吸收传递能量的作用。　　 本文对辅基与光解酶蛋白的结合作了研究。结果表明，氧化状态FAD的结合平衡常数显著低于还原状态。因此在氧化的光解酶溶液中，出现了更多的脱辅基蛋白，表现出更低的热稳定性，并且失去了部分活性。我们又发现，MTHF辅基的结合能力随离子强度的减小而降低，说明MTHF辅基可能是通过静电相互作用与蛋白结合。在研究过程中，发现了一种用碱性咪唑溶液孵育制备脱辅基光解酶的方法，以及配合Ni2+亲和层析的用蒸馏水冲洗去除光解酶中MTHF辅基的方法。

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摘要

文献综述

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实验结果

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参考文献

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