肺鳞癌患者血清25羟基维生素D水平及其与氧化应激、DNA损伤的关系

摘要

目的：本研究旨在探讨肺鳞癌患者血清中25羟基维生素D水平与氧化应激及DNA损伤间的关系,研究血清25羟基维生素D对肺鳞癌患者是否存在保护作用。　　方法：选取2016年4月-2017年4月于西南医科大学附属医院呼吸内科就诊的肺鳞癌患者60例作为肺鳞癌组,选取同期健康体检者30例作为正常对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定研究对象血清中25羟基维生素D水平;采用黄嘌呤氧化酶法及硫代巴比妥酸(TBA)法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;运用流式细胞仪通过二氢乙啶（DHE）及2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针检测外周血单个核细胞(PBMC)胞内活性氧指标DHE、DCF的平均荧光强度,运用流式细胞仪测定外周血单个核细胞的γ-H2AX平均荧光强度以及γ-H2AX水平反应外周血单个核细胞的DNA损伤程度,并对25羟基维生素D水平与γ-H2AX、DHE、DCF平均荧光强度、γ-H2AX水平、SOD活力及MDA含量进行相关性分析。　　结果：1.ELISA法测定血清25羟基维生素D水平显示,肺鳞癌组患者血清25羟基维生素D水平（19.42±6.45）ng/ml明显低于正常对照组（56.08±15.16）ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05)。2.黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD活力显示,肺鳞癌组患者血清SOD活力（63.41±21.55）U/ml明显低于正常对照组(106.09±11.56)U/ml,差异有统计学意义(P＜0.05),硫代巴比妥酸法检测血清MDA含量显示,肺鳞癌组患者血清MDA含量（17.94±7.19）nmol/ml明显高于正常对照组（5.49±2.41）nmol/ml,差异有统计学意义(P＜0.05)。3.流式细胞仪检测外周血单个核细胞的DHE、DCF平均荧光强度显示,肺鳞癌组的DHE平均荧光强度（169.52±22.42）明显高于正常对照组（96.39±9.51）,差异有统计学意义(P＜0.05),肺鳞癌组的DCF平均荧光强度（136.54±16.94）明显高于正常对照组（78.04±12.06）,差异有统计学意义(P＜0.05)。4.流式细胞仪检测外周血单个核细胞的γ-H2AX水平及其平均荧光强度显示,肺鳞癌组的γ-H2AX水平（37.91％±16.55％）明显高于正常对照组（3.51％±1.16％）,差异有统计学意义(P＜0.05),肺鳞癌组的γ-H2AX平均荧光强度（8.74±1.98）明显高于正常对照组(3.63±0.60),差异有统计学意义(P＜0.05)。5.相关性分析结果显示：肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与外周血单个核细胞的DHE平均荧光强度呈负性相关(P＜0.05),肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与外周血单个核细胞的DCF平均荧光强度呈负性相关(P＜0.05),肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与外周血单个核细胞的γ-H2AX平均荧光强度呈负性相关(P＜0.05),肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与外周血单个核细胞的γ-H2AX水平呈负性相关(P＜0.05),肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与血清MDA含量呈负性相关(P＜0.05),肺鳞癌组血清25羟基维生素D水平与血清SOD活力呈正性相关(P＜0.05)。　　结论：1.肺鳞癌患者明显存在25羟基维生素D不足或者是缺乏的现象。2.肺鳞癌患者血清MDA含量明显升高,血清SOD活力明显下降,外周血单个核细胞的DCF、DHE平均荧光强度明显升高,肺鳞癌患者外周血存在明显的氧化应激。3.肺鳞癌患者外周血单个核细胞的DNA损伤率及γ-H2AX平均荧光强度明显升高,肺鳞癌患者外周血存在明显的DNA损伤。4.肺鳞癌患者血清25羟基维生素D水平与氧化应激呈负相关。5.肺鳞癌患者血清25羟基维生素D水平与DNA损伤呈负相关。6.25羟基维生素D可能减轻肺鳞癌的氧化应激及DNA损伤。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验对象

2 主要实验试剂

3 主要实验仪器

4 实验方法

5．统计学处理

结果

1．两组研究对象血清25羟基维生素D水平的表达

2．两组研究对象外周血单个核细胞胞内ROS水平的表达

3．两组研究对象血清氧化应激指标SOD活力、MDA含量比较

4．两组研究对象外周血单个核细胞DNA损伤指标比较

5．肺鳞癌组血清25羟基维生素D与DHE、DCF的相关性

6．肺鳞癌组血清25羟基维生素D与血清SOD活力及MDA含量的相关性

7．肺鳞癌组血清25羟基维生素D与DNA损伤率及γ-H2AX平均荧光强度的相关性

讨论

结论

参考文献

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致谢

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