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摘要
主要缩写词说明
第1章mTOR与FKBP39的研究进展
1．1．1 mTORC1蛋白复合体及其活性调节
1．1．2 TORC1抑制剂的开发及其临床应用
1．1．3 GATOR复合体的研究进展
1．2 FKBPs蛋白家族及其功能
1．2．1 FKBP39的研究进展
1．2．2 CRISPR-Cas9技术构建突变体果蝇
1．3研究的目的与意义
第2章实验材料及其方法
2．1实验材料
2．1．1果蝇品系
2．1．3实验试剂
2．2主要试剂配制
2．3实验方法
2．3．1果蝇培养条件
2．3．2果蝇杂交
2．3．3构建fkbp39突变体果蝇
2．3．4fkbp39突变体果蝇的鉴定
2．3．5通过Gateway方法构建HA-Fkbp39
2．3．6免疫印迹方法
2．3．7实时荧光定量PCR方法
2．3．8 dsRNA的制备
2．3．9 BCA蛋白浓度测定
2．3．10 DH5a转化方法
2．3．11 S2细胞培养方法
2．3．12 S2细胞饥饿方法
2．3．13 S2细胞的转染
2．3．14免疫共沉淀(Co-IP)方法
2．3．15 S2细胞RNAi实验
2．3．16 CHX处理S2细胞实验
2．3．17 Act D处理S2细胞实验
2．3．18果蝇卵巢组织体外培养的方法
2．3．19统计学方法
第3章实验结果与分析
3．1氨基酸缺乏增强Nprl3蛋白稳定性促进其表达
3．1．1氨基酸缺乏诱导Nprl3表达增加
3．1．2氨基酸缺乏增强Nprl3蛋白稳定性
3．2 FKBP39通过蛋白稳定性抑制Nprl3表达
3．2．1在S2细胞中Nprl3与FKBP39结合
3．2．2在S2细胞中FKBP39与Nprl3结合
3．2．3 FKBP39抑制Nprl3表达
3．2．4 FKBP39通过蛋白稳定性来抑制Nprl3表达
3．3 FKBP39结合并抑制Nprl2表达
3．4 FKBP39生理功能的研究
3．4．1构建与鉴定fkbp39突变体果蝇
3．4．2在果蝇成体中FKBP39抑制Nprl3的表达
3．4．3 FKBP39促进TORCI的活性
3．5讨论与分析
3．5．1氨基酸缺乏导致Nprl2和Nprl3蛋白稳定性增加
3．5．2 FKBP39与Nprl3和Nprl2结合并促进其降解
3．5．3 FKBP39促进TORC1活性
3．6结论
3．7创新点与不足
参考文献
攻读硕士期间的研究成果
致谢
扬州大学;
