声明
摘要
主要缩写词
第1章文献综述
1．1衰老与雷帕霉素信号(TOR)
1．1．1衰老的研究现状
1．1．2 TOR复合体1(TORC1)与衰老间的联系
1．1．3 TOR与疾病的发生
1．1．4 GATOR1复合体抑制TORC1活性
1．1．5 GATOR1参与疾病的发生
1．2果蝇
1．2．1果蝇基本特性
1．2．2果蝇作为衰老模型建立的优势
1．3胃肠道与衰老
1．3．1果蝇胃肠道与哺乳动物胃肠道结构的异同
1．3．2胃肠道与衰老间的联系
1．3．3果蝇肠道干细胞是研究衰老的良好模型
1．3．4脂代谢失衡影响肠道衰老进程
1．3．5肠道损伤影响衰老进程
1．4研究目的与意义
第2章Nprl2在果蝇胃肠道衰老中的功能
2．1材料及仪器
2．1．1果蝇品系
2．1．2引物设计
2．1．3主要试剂
2．1．4主要试剂配制
2．1．5主要实验仪器
2．2实验方法
2．2．1果蝇杂交
2．2．2 UAS／GAL4 GAL80热敏体系
2．2．3果蝇培养基制备
2．2．4果蝇培养条件
2．2．5 nprl2突变体果蝇基因型鉴定
2．2．6 Western blot测定TORC1蛋白活性
2．2．7果蝇组织解剖
2．2．8果蝇存活实验
2．2．9果蝇crop体积的测量
2．2．10果蝇crop内容物有无测定
2．2．11 Crop细胞轮廓免疫荧光染色与共聚焦显微镜
2．2．12食物在果蝇体内完全代谢实验
2．2．13毛细管(CAVE)喂养实验
2．2．14果蝇排便实验
2．2．15紫外分光光度计法测定食物的分布实验
2．2．16 Crop收缩性实验
2．2．17果蝇肠道长宽测量
2．2．18肠道干细胞免疫荧光染色与共聚焦显微镜
2．2．19 EdU法检测ISCs增殖实验
2．2．20肠道脂含量(Nile red染色)测定
2．2．21喂食SDS检测肠道损伤情况
2．2．22检测肠道抗茵肽基因表达差异
2．3实验结果分析
2．3．1 PCR法验证nprl2突变果蝇
2．3．2 nprl2基因突变使果蝇寿命缩短
2．3．3 nprl2基因突变影响衰老果蝇胃消化功能
2．3．4 Crop增大是由其细胞膜伸展性所致
2．3．5 Nprl2蛋白影响crop消化功能
2．3．6 nprl2基因是胃肠道运动所必需
2．3．7 nprl2基因突变对果蝇胃肠道运动的影响
2．3．8 nprl2果蝇的TORC1活性
2．3．9 TORC1活性对胃肠道运动影响
2．3．10雷帕霉素药物对胃肠道食物分布影响
2．3．11 Nprl2蛋白对衰老果蝇肠道的影响
2．3．12 Nprl2蛋白影响肠道干细胞稳态
2．3．13 Nprl2蛋白影响千细胞增殖能力
2．3．14 Nprl2蛋白影响肠道干细胞分化
2．3．15 Nprl2蛋白影响肠道脂代谢
2．3．16 Nprl2蛋白对肠道的保护作用
2．3．17 Nprl2蛋白影响肠道抗茵肽表达
2．4讨论与分析
2．4．1衰老对果蝇crop大小和消化功能的影响
2．4．2 TORC1的过度激活加速老化和与年龄有关的消化系统疾病
2．4．3 nprl2突变体是研究衰老的良好模型
2．4．4 TORC1的过度激活促进肠道老化
2．5结论
2．5．1总结
2．5．2创新点与不足
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
