日本鳗鲡干扰素调节因子11(IRF11)的转录调控及功能的初步研究

目录

声明

主要缩略词表

第1章引言

1.1 鱼类Ⅰ型干扰素的研究概况

1.2 鱼类干扰素调节因子的研究概况

1.3 IRF1亚家族的研究概况

1.3.1 哺乳动物IRF1和IRF2的研究概况

1.3.2 鱼类IRF1亚家族的研究概况

1.4 研究目的与意义

1.5 研究内容与技术路线

第2章日本鳗鲡IRF11基因的表达及转录调控分析

2.1 实验材料

2.1.1 日本鳗鲡、细胞

2.1.2 实验仪器设备

2.1.3 实验试剂

2.1.4 引物

2.2 实验方法

2.2.1 RACE-PCR获取基因全长

2.2.2 质粒提取

2.2.3 荧光定量PCR

2.2.4 IRF11启动子报告质粒的构建

2.2.5 启动子分析实验

2.3.1 cDNA的克隆及序列分析

2.3.2 氨基酸序列分析及系统进化树

2.3.3 基因共线性分析

2.3.4 免疫刺激后AjIRF11的基因表达变化

2.3.5 鱼类IRF11启动子序列分析

2.3.6 AjIRF11启动子活性分析

2.3.7 AjIRF11转录调控分析

2.4 小结与讨论

第3章日本鳗鲡IRF11的核定位信号的研究

3.1.1 细胞

3.1.2 实验仪器设备

3.1.3 实验试剂

3.1.4 引物

3.2 实验方法

3.2.1 细胞培养

3.2.2 质粒构建

3.2.3 核苷酸定点突变

3.2.4 HEK293T细胞转染

3.2.5 免疫细胞化学

3.3 实验结果

3.3.1 IRF11核定位信号预测

3.3.2 IRF11的亚细胞定位

3.4 小结与讨论

第4章日本鳗鲡IRF11抗病毒免疫分子机理研究

4.1.1 细胞

4.1.2 实验仪器设备

4.1.3 实验试剂

4.1.4 引物

4.2.1 细胞培养

4.2.2 IFN和Mx启动子报告质粒的构建

4.2.3 EPC细胞的转染和荧光素酶活性检测

4.2.4 AjIRF11对细胞抗病毒基因的调控

4.3 实验结果

4.3.1 IFN和Mx启动子报告质粒的构建

4.3.2 Poly I:C对IFN和Mx启动子活性调控作用

4.3.3 AjIRF11对IFN和Mx启动子活性调控作用

4.3.4 qPCR检测IRF11对ISGs的调控作用

4.4 小结与讨论

总结与展望

致 谢

参考文献

在学期间科研成果情况