核磁共振技术在中药品质与活性评价中应用研究

摘要

本论文以核磁共振技术在中药品质与活性评价中应用为研究内容，开展了如下研究：　　1．核磁定量技术应用于环烯醚萜与人参皂苷的纯度测定　　建立了评价环烯醚萜、人参皂苷类天然产物纯度的核磁定量方法，并分别以5种环烯醚萜苷、6种人参皂苷为例进行了纯度测定。两类天然产物核磁定量方法均以3位质子为定量质子，分别以对二硝基苯、对氯苯甲醛为内标，以氘代甲醇、氘代吡啶为溶剂，经过系统的方法学验证。实验结果进一步通过高效液相色谱法验证，表明所建立的核磁定量方法准确可行。　　2．核磁共振技术应用于中药秦艽的品质评价　　以秦艽药材为例，自建龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷与獐芽菜苷标准核磁共振氢谱数据库，采用靶向轮廓分析核磁定量法，测定了秦艽中以上4种环烯醚萜的含量。实验测定结果与高效液相色谱法比较表明：所建立的核磁定量法可用于秦艽中龙胆苦苷和马钱苷酸成分的含量测定；但并不适合于秦艽中獐牙菜苦苷和獐芽菜苷成分含量测定，推测可能该化合物含量较低，去卷积过程中引入较大误差。　　将核磁共振技术与模式识别技术相结合，建立了区分秦艽、粗茎秦艽、麻花艽和小秦艽四种秦艽药材的核磁共振方法，并对未知秦艽药材进行判别。所建立的方法准确可行，可用于秦艽药材的种间鉴别。　　3．核磁共振代谢组学方法应用于姜黄素与京尼平苷酸的降脂活性评价　　以高脂饲料连续喂养12周诱导小鼠高血脂模型，以洛伐他汀为阳性药，诱导期内小鼠同时口服给予洛伐他汀(30 mg/kg)、姜黄素(40，80 mg/kg)或京尼平苷酸(100，300 mg/kg)，第12周末收集小鼠血清与尿液。对血清进行TC、TG、LDL-c与HDL-c等生化指标检测，以初步评价姜黄素或京尼平苷酸的降脂活性。同时对小鼠尿液展开基于核磁共振的代谢组学分析，评价姜黄素或京尼平苷酸的降脂作用，并就二化合物对机体的代谢调节作用进行探讨。在核磁共振代谢组学实验的基础上，对小鼠尿液展开基于TOF/MS的代谢组学辅助分析，正负离子模式下均验证了核磁共振代谢组学实验结果，并进一步补充揭示了姜黄素或京尼平苷酸对高脂状态下脂肪酸氧化的调控信息。实验结果表明：姜黄素(40，80 mg/kg)、京尼平苷酸(300 mg/kg)与洛伐他汀(30 mg/kg)具有相似的降脂活性，且其对高脂机体代谢调节作用与洛伐他汀具有一定的相似性，主要通过抑制胆固醇生成、改善三羧酸循环、改善脂肪酸氧化等途径部分恢复了机体的代谢异常。

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