以BCR-ALB为靶点的伊马替尼类似物的设计、合成及抗肿瘤活性评价

摘要

慢性粒细胞白血病(CML)的发病机制是由于染色体t(9;22)易位，原本位于9号染色体上的ABL基因与22号染色体上的BCR基因平行易位而成为BCR-ABL融合基因，易位后的BCR-ABL融合基因编码的P210BCL—ABL蛋白的酪氨酸激酶被异常激活，它通过不同途径自主地传导信号，干扰靶细胞的基本活动，从而引起细胞增殖恶变，导致CML的发生。因此，筛选出能够抑制BCR-ABL激酶而又不影响正常细胞的小分子化合物，成为治疗白血病的主流理念。伊马替尼（STI571，格列卫）能有效的、选择性的抑制BCR-ABL激酶，从而一跃成为治疗白血病的一线药物。虽然大多数确诊的患者对伊马替尼有持久的反应，但是患者频繁的复发率和耐药性刺激药企对第二代抗白血病药物的开发，如达沙替尼和尼罗替尼。随着每年白血病患者人数的增多，研究人员致力于开发更多有效的小分子抑制剂，为白血病患者带来新的希望。
　　 近几年来许多研究人员发现，植物尤其是药用植物中的天然产物是具有潜在治疗效用的化合物。苯丙烯酸衍生物是一类自然界中的天然产物，它们具有广泛的药理活性，如抗细菌，抗病毒，抗肿瘤，抗氧化等。因此，本文利用拼合原理将伊马替尼药效团与苯丙烯酸衍生物拼合得到苯丙烯酰胺类伊马替尼类似物。另外，水杨酸是植物的次生代谢产物，将水杨酸及其结构类似物与伊马替尼药效团以酰胺键结合起来即得到一系列芳基羧酸类伊马替尼衍生物。
　　 在伊马替尼中间体的合成研究基础上，对设计的两类伊马替尼类生物进行合成，并通过1HNMR和LC-MS对合成的类似物进行结构表征和确证。新化合物的合成路线操作简便，原料易得，反应条件温和，并且产物收率较高。在生物活性评价试验中，采用MTT法测试了这些类似物对人白血病细胞株K562的抑制活性，大多数化合物显著抑制K562细胞的增殖，其中，化合物AA-03、AA-09、AA-18、BB-01和BB-02的抗K562增殖活性优于伊马替尼。Westernblot试验进一步验证这些化合物是通过靶向作用于BCR-ABL从而引起K562细胞凋亡。本文对生物活性评价结果进行初步构效关系讨论，为将更多的天然产物引入新药设计和筛选更高活性的新化合物提供基础。

目录

声明

摘要

致谢

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 魔术弹：伊马替尼

1．3 快速跟随者：达沙替尼和尼罗替尼

1．4 “Me-too”药在新药研究中的地位

1．5 计算机辅助药物设计

1．5．1 CADD的一般原理

1．5．2 CADD的设计方法

1．6 伊马替尼类似物研究进展

1．7 本课题研究目的和研究内容

1．7．1 研究目的

1．7．2 研究内容

第二章 伊马替尼类似物的设计

2．1 引言

2．2 拼合原理及其在抗肿瘤药物领域的应用

2．3 目标化合物的设计

2．3．1 苯丙烯酰胺类伊马替尼类似物的设计

2．3．2 芳基羧酸类伊马替尼类似物的设计

2．4 本章小结

第三章 伊马替尼类似物的合成

3．1 引言

3．2 实验部分

3．2．1 试剂与仪器

3．2．2 实验内容

3．3 结果与讨论

3．3．1 伊马替尼中间体的合成工艺研究

3．3．2 伊马替尼类似物的合成

3．4 本章小结

第四章 伊马替尼类似物的生物活性评价

4．1 引言

4．2 实验部分

4．2．1 试剂与仪器

4．2．2 实验内容

4．3 结果与讨论

4．3．1 MTT实验结果

4．3．2 MTT实验结果分析

4．3．3 Western blot实验结果与分析

4．4 本章小结

第五章 结论与展望

5．1 结论

5．2 展望

参考文献

攻读硕士学位期间发表的论文