声明
第1章 文献综述
1.1 苦皮藤简介
1.2 植物萜类化合物简介
1.2.1 植物萜类化合物的分类
1.2.2 植物萜类化合物的生物合成
1.3 植物酰基转移酶的研究进展
1.3.1 植物BAHD酰基转移酶的结构
1.3.2 植物BAHD酰基转移酶的催化机制
1.4 分子模拟方法简介
1.4.1 同源模建
1.4.2 分子对接
1.4.3 分子动力学模拟
1.5 本课题研究的内容与意义
第2章 酰基转移酶CaAT20重组蛋白的表达及功能鉴定
2.1 实验材料
2.1.1 实验菌株和质粒
2.1.2 实验仪器
2.1.3 实验试剂与药品
2.1.4 培养基和试剂溶液
2.2 实验过程
2.2.1 生物信息学分析
2.2.2 大肠杆菌重组表达载体的构建
2.2.3 酰基转移酶大肠表达系统的优化
2.2.4 酰基转移酶的功能鉴定
2.3 结果分析
2.3.1 生物信息学结果分析
2.3.2 大肠杆菌重组表达载体的构建结果分析
2.3.3 酰基转移酶大肠表达系统的优化结果分析
2.3.4 体外酰基化反应的结果分析
2.4 本章小结
第3章 酰基转移酶CaAT20作用机制的研究
3.1 实验材料
3.2 计算平台
3.2.1 硬件平台
3.2.2 软件平台
3.3 实验过程
3.3.1 CaAT20的同源模建
3.3.2 CaAT20与香叶醇的分子对接
3.3.3 CaAT20-香叶醇复合物的分子动力学模拟
3.3.4 CaAT20关键氨基酸位点的实验验证
3.4 结果分析
3.4.1 CaAT20的同源模建结果分析
3.4.2 CaAT20与香叶醇的分子对接结果分析
3.4.3 CaAT20-香叶醇复合物的分子动力学结果分析
3.4.4 CaAT20关键氨基酸位点的实验验证结果分析
3.5 本章小结
第4章 酰基转移酶CaAT20的酶活优化研究
4.1 实验材料
4.1.1 实验菌株和质粒
4.1.2 实验仪器
4.1.3 实验试剂与药品
4.1.4 培养基与试剂溶液
4.2 计算平台
4.2.1 硬件平台
4.2.2 软件平台
4.3 实验过程
4.3.1 CaAT20突变体的分子模拟研究
4.3.2 CaAT20突变体的体外功能鉴定
4.4 结果分析
4.4.1 CaAT20突变体的分子模拟结果分析
4.4.2 CaAT20突变体体外酰基化反应结果分析
4.5 本章小结
第5章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
致谢
天津大学;
