Msx1在激素调控山羊子宫内膜上皮细胞重塑中的作用研究

目录

声明

第一章 子宫内膜容受性的研究进展

1.1子宫内膜

1.1.1 子宫内膜结构

1.1.2 子宫内膜的发育

1.2子宫内膜容受性

1.2.1子宫内膜上皮细胞重塑

1.2.2子宫内膜容受性的分子生物学指标

1.3参与调节子宫内膜功能的激素

1.3.1雌激素的调节作用

1.3.2 孕酮的调节作用

1.3.3 干扰素 τ的调节作用

第二章 同源盒基因研究进展

2.1 同源盒基因

2.2 Msx基因家族

2.2.1 Msx1 的基因结构

2.2.2 Msx1 的功能

2.3 Msx1 在胚胎植入中的作用

2.5 研究目的与意义

第三章 激素对Msx1 表达和山羊子宫内膜上皮细胞重塑的影响

3.1 材料

3.1.1 主要试剂

3.1.2 主要仪器

3.2 方法

3.2.1 永生化山羊子宫内膜上皮细胞（EECs）的培养

3.2.2 子宫内膜上皮细胞的激素

3.2.3 细胞总 RNA 的提取

3.2.4 RT- qPCR 检测

3.2.5 细胞全蛋白的提取

3.2.6 Western Blot 分析

3.2.7 数据统计分析

3.3 结果与分析

3.3.1 不同浓度雌激素或孕酮刺激下 Msx1 的表达情况

3.3.2在模拟妊娠早期的子宫内膜激素环境时Msx1的表达情况

3.3.3 激素的联合作用对子宫内膜上皮细胞的重塑的影响

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 Msx1 对山羊子宫内膜上皮细胞重塑的影响

4.1 材料

4.1.1 菌株和质粒

4.1.2主要试剂

4.1.2 主要仪器

4.2 方法

4.2.1 EECs 和 GTCs 的培养

4.2.2 山羊 Msx1 基因 shRNA慢病毒载体构建

4.2.3 山羊 Msx1 过表达载体的构建

4.2.4 细胞免疫荧光

4.2.5 前列腺素的检测

4.2.6 细胞粘附能力的检测

4.2.7 数据统计分析

4.3 结果与分析

4.3.1 shMsx1 慢病毒干扰载体构建、包装和鉴定

4.3.2干扰Msx1对子宫内膜上皮细胞功能的影响

4.3.3 干扰 Msx1 对子宫内膜上皮细胞重塑的影响

4.3.4 Msx1 重组过表达载体的构建与检测

4.3.5 Msx1 重组过表达质粒效率检测

4.3.6 过表达 Msx1 对子宫内膜重塑的影响

4.3.7 过表达 Msx1 对 EECs 中促进孕体伸长基因表达的影响

4.4 讨论

4.5 小结

第五章 内质网应激介导的UPR 通路在Msx1 调控子宫内膜上皮细胞重塑中的作用

5.1 材料

5.1.1 主要试剂

5.1.2 主要仪器

5.2 方法

5.2.1 shMsx1 EECs 的培养

5.2.2 内质网应激激活剂、抑制剂对 EECs 的处理

5.2.3 全 RNA提取和 RT-qPCR 检测

5.2.4细胞全蛋白的提取和 Western Blot 分析

5.2.5 数据统计分析

5.3 结果与分析

5.3.1 激素联合作用下干扰 Msx1 对 UPR 通路的影响

5.3.2 Tg或 4-PBA预处理 shMsx1 EECs 对子宫内膜上皮细胞重塑的影响

5.4 讨论

5.5 小结

结论

参考文献

附录

缩略词

致谢

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