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第一章：绪论
1.1 β-半乳糖苷酶
1.1.1 β-半乳糖苷酶概述
1.1.2 β-半乳糖苷酶的应用
1.1.3 β-半乳糖苷酶的家族分类及生物学特征
1.2 E.coli β-半乳糖苷酶的一般生物学特征
1.2.1 E.coli β-半乳糖苷酶的酶活性
1.2.2 E.coli β-半乳糖苷酶的结构
1.2.3 E.coli β-半乳糖苷酶的催化机制
1.2.4 E.coli β-半乳糖苷酶的底物结合模式
1.3 human β-半乳糖苷酶的一般生物学特征
1.3.1 human β-半乳糖苷酶概述
1.3.2 human β-半乳糖苷酶的结构
1.3.3 A.O. β-半乳糖苷酶的结构
1.3.4 三种 β-半乳糖苷 酶的结构比较
1.4与衰老相关的β-半乳糖苷酶的研究进展
1.4.1 衰老的定义及与之相关的疾病
1.4.2 与衰老相关的生物标记物
1.4.3 荧光探针检测 SA-β-Gal
1.5 蛋白质晶体学研究
1.5.1 蛋白质结晶方法
1.5.2 蛋白质-配体复合物晶体的制备
1.6 研究背景及意义
第二章：野生型及突变型E.coli β-半乳糖苷酶基因的克隆及表达
2.1 材料与设备
2.1.1 实验所需菌株细胞及质粒
2.1.2实验主要试剂
2.1.3实验仪器及设备
2.1.4 常用溶液及配制方法
2.2 实验方法
2.2.1 引物设计
2.2.2 E.coli β-gal 基因扩增及表达载体构建
2.2.3 E.coli β-gal 定点突变及表达载体构建
2.2.4 野生型及突变型 E.coli β-gal 基因的大量表达
2.2.5 野生型及突变型 E.coli β-gal 的纯化
2.2.6 human β-gal 目的基因与质粒 pFastBac的重组
2.2.7 产生重组 bacmid
2.2.8 human β-gal 在昆虫细胞中的表达及纯化
2.2.9 Western blot
2.3结果讨论
2.3.1 E.coli β-Gal 基因表达载体的构建
2.3.2 E.coli β-Gal E537Q 突变体表达载体的构建
2.3.3 E.coli β-gal 突变体的表达及纯化
2.3.4 human β-gal-pFastBac重组质粒的构建
2.3.5. Western blot验证 human β-gal蛋白的表达 蛋白的表达
2.3.6 human β-gal 蛋白的纯化
2.4本章小结
第三章：E.coli β-gal E537Q与不同荧光探针复合物结晶及晶体结构
3.1材料与方法
3.1.1 实验试剂及仪器
3.1.2 E.coli β-gal E537Q结晶条件的筛选与优化
3.1.3 E.coli β-gal E537Q与荧光探针复合物晶体的制备
3.1.4 蛋白质复合物 x射线晶体衍射数据的收集及结构解析
3.2结果与讨论
3.2.1 蛋白质晶体的筛选结果
3.2.2 复合物晶体衍射数据的收集及处理
3.2.3 E.coli β-gal E537Q与探针 GY1，GY2 及 KSL01的结构分析
3.3 本章小结
结论
参考文献
致谢
西北大学;
