苦瓜茎叶部分三萜成分的纯化、结构鉴定及其抗脂肪沉积功能的初步研究

摘要

苦瓜（Momordica charantia）系葫芦科(Cucurbitaceae)苦瓜属植物，在亚洲许多国家作为一种经常食用的蔬菜，很早在民间就广泛用于减肥降糖。此前，苦瓜化学成分和药理活性研究主要集中在果实部位，而对于其茎叶部分研究较少。因此，本研究纯化了苦瓜茎叶三萜化合物，并就其抗脂肪沉积活性进行了初步探讨。
　　为了进一步研究结构新颖及生物活性良好的化学成分，本论文选择新疆苦瓜茎叶部分为研究对象，对其三萜化合物进行分离纯化。我们将20 kg干燥的苦瓜茎叶部分粉碎，用甲醇溶液回流提取3次，提取液合并，利用减压蒸馏除去大部分甲醇后得浸膏。将甲醇提取物用水分散，分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇充分萃取。乙酸乙酯萃取物(432 g)上大孔树脂拌，以水∶甲醇(55∶45，40∶60，25∶75，15∶85)梯度洗脱。75％部分(160 g)为从25∶75的水∶甲醇洗脱部分，利用反相C18柱、正相硅胶柱层析和半制备HPLC等分离方法，得到15个葫芦烷型三萜类化合物，其中7个为新化合物。通过MS、1D NMR和2D NMR(HSQC，HMBC，COSY, ROESY)等波谱学技术对化合物结构进行鉴定。其中新化合物为cucurbita-6,24-dien-3β,23-diol-19,5β-olide(1),(19R)-5β,19-epoxy-19-methoxy-cucurbita-6,24-dien-3β,23-diol(2),(19S)-5β,19-epoxy-19-methoxycucurbita-6,24-dien-3β,23-diol(3),(19R)-5β,19-epoxy-19-isopropoxycucurbita-6,24-dien-3β,23-diol(4)，3β，23-dihydroxy-5-methoxycucurbita-6,24-dien-19-al(5),(19R)-7β,19-epoxy-19-methoxycucurbita-5,24-dien-3β,23-diol(6)和7β-methoxycucurbita-6,24-dien-3β，9，23-triol(7)。这是第一次在苦瓜中发现了在C-7、C-19位成环氧的葫芦烷型三萜化合物，即(19R)-7β，19-epoxy-19-methoxycucurbita-5，24-dien-3β，23-diol(6)。为了寻找可能的抗脂肪沉积有效成分，我们利用3T3-L1前细胞脂肪分化系统，对部分三萜化合物2、6、8和9进行了活性筛选实验，结果显示，化合物6表现出对3T3-L1细胞脂肪沉积具有一定的抑制作用。

目录

声明

致谢

摘要

第一章 前言

1．1 药理活性

1．1．1 降血糖作用

1．1．2 降血脂、抗肥胖作用

1．1．3 对免疫功能的影响

1．1．4 抗生育作用

1．1．5 抗病毒作用

1．1．6 抗肿瘤作用

1．1．7 抗氧化作用

1．1．8 抗菌作用

1．2 化学成分

1．2．1 酚类和黄酮化合物

1．2．2 葫芦烷型三萜化合物

1．2．3 葫芦烷型三萜苷类化合物

1．2．4 齐墩果烷型三萜皂苷

1．2．5 多肽类

1．3 本课题研究的目的和意义

1．4 课题研究的主要内容

1．5 课题研究路线

第二章 材料与方法

2．1 苦瓜茎叶部分三萜化合物的提取与分离

2．1．1 实验仪器与材料

2．1．2 样品的来源

2．1．3 提取与分离过程

2．2 抗脂肪沉积活性筛选实验

2．2．1 实验材料

2．2．2 实验步骤

2．2．3 数据收集与统计分析

第三章 结果与分析

3．1 实验结果

3．2 新化合物的结构解析

3．2．1 化合物1的结构解析

3．2．2 化合物2和3的结构解析

3．2．3 化合物4的结构解析

3．2．4 化合物5的结构解析

3．2．5 化合物6的结构解析

3．2．6 化合物7的结构解析

3．3 化合物的理化常数和波谱数据

3．4 苦瓜三萜化合物对3T3-L1的细胞毒性以及脂肪沉积的影响

3．4．1 MTT结果

3．4．2 3T3-L1细胞培养及诱导分化及油红染色

第四章 结论

参考文献

攻读硕士学位期间的学术活动及发表的论文