声明
缩略语
第一章 引言
1.1 红曲菌
1.2 桔霉素
1.2.1 桔霉素概述
1.2.2 桔霉素的检测方法
1.2.3 桔霉素的控制方法
1.3 基因敲除技术
1.3.1 基因敲除技术概述
1.3.2 提高同源重组效率的策略
1.3.3 基因敲除在丝状真菌中的应用
1.4 Rab蛋白
1.5 转录组学的应用
1.5.1 转录组学概述
1.5.2 RNA-Seq技术
1.5.3 转录组学技术在红曲菌中的应用
1.6 主要研究内容及意义
第二章 ku70缺失株的构建
2.1 材料，仪器及试剂
2.1.1 菌种与质粒
2.1.2 酶和试剂
2.1.3 缓冲溶液和培养基
2.1.4 主要仪器设备
2.2 方法与步骤
2.2.1 孢子的获得
2.2.2 减弱红曲菌自发荧光强度培养条件的优化
2.2.3 红曲菌菌丝荧光分析
2.2.4 ku70基因鉴定与分析
2.2.5 pKU70-pyrG打靶载体的构建
2.2.6 ku70 5-hph-ku70 3的构建
2.2.7 PEG-CaCl2介导的原生质体转化
2.2.8 缺失菌株的验证
2.3 实验结果
2.3.1 红曲菌自发荧光强度培养条件的优化
2.3.2 转化子荧光分析
2.3.3 ku70基因的鉴定与分析
2.3.4 pKU70-pyrG打靶载体的构建
2.3.5 UM28原生质体转化
2.3.6 缺失菌株的验证
2.3.7 ku70 5-hph-ku70 3的构建
2.3.8 AS3.4384原生质体转化
2.3.9 缺失菌株的验证
2.4 讨论
2.4.1 荧光蛋白表达
2.4.2 原生质体的研究
2.4.3 基因敲除的研究
2.4.4 基因组DNA的提取
2.5 小结
第三章 橙色红曲菌Rab蛋白家族的研究
3.1 材料，仪器及试剂
3.1.1 菌种与质粒
3.1.2 酶和试剂
3.1.3 缓冲溶液和培养基
3.1.4 主要仪器设备
3.2 方法与步骤
3.2.1 橙色红曲菌Rab蛋白家族的生物信息学分析
3.2.2 pRab7-pyrG打靶载体的构建
3.3 实验结果
3.3.1 橙色红曲菌Rab蛋白家族的生物信息学分析
3.3.2 pRab7-pyrG打靶载体的构建
3.4 讨论
3.5 小结
第四章 AS3.4384液态发酵中桔霉素含量的测定及转录水平
4.1 材料，仪器及试剂
4.1.1 菌种
4.1.2 试剂
4.1.3 缓冲液和培养基
4.1.4 主要仪器设备
4.2 方法与步骤
4.2.1 桔霉素含量分析
4.2.2 RNA的提取
4.2.3 RNA-seq
4.3 实验结果
4.3.1 桔霉素含量分析
4.3.2 RNA-seq结果分析
4.3 讨论
4.4 小结
第五章 结论与展望
5.1 结论
5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
南昌大学;
