麝香保心丸对ET-1诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘要

目的：研究麝香保心丸对内皮素诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用。　　方法：贴块法原代培养人脐动脉血管平滑肌细胞。实验分成六组：不加任何干预组，ET-1组，ET-1加麝香保心丸干预组（0.5、1、2、4mg/ml).用内皮素1剌激人脐动脉平滑肌细胞增殖,以细胞计数试剂盒计数细胞个数、流式细胞仪检测DNA的合成量和细胞周期作为细胞增殖的指标,并应用台盼兰拒染、乳酸脱氢酶检测观察麝香保心丸的细胞毒性反应。　　结果：内皮素1(10-7 mol/ L)可明显促进细胞增殖(与对照组相比,P<0.01)和DNA合成;麝香保心丸可抑制内皮素1所诱导的细胞增殖(与内皮素-1组相比,P<0.01)和细胞周期分布;ET-1可促进细胞从G0/G1到S期的转化，与不加内皮素组相比，ET-1组S期细胞比例增加（20.20±1.48 vs3.30±0.45，P<0.01），G0/G1期细胞比例减少（59.60±3.85 vs80.60±2.70，P<0.01）。而ET-1加麝香保心丸药物组与ET组相比可显著抑制和延缓这种作用。麝香保心丸的抑制作用与浓度存在明显的依赖关系,但对活细胞数目和乳酸脱氢酶释放量均没有影响(P>0.05)。　　结论：麝香保心丸(1-4mg/mL)可浓度依赖性地抑制内皮素1所诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖,且抑制作用并非是通过细胞毒性作用实现的。

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缩略词表

前言

1 材料和方法

1.1 材料与仪器

1.2 药液及溶剂的制备

（1）麝香保心丸药液的制备：

（2）MTT溶液的制备：

（4）DMEM培养基

（5）DAB显色试剂盒组成及使用方法

1.3 人脐动脉平滑肌细胞的培养和鉴定

1.4 MTT法检测麝香保心丸及内皮素对人脐动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

1.5 流式细胞仪检测VSMC周期

1.6 不同浓度麝香保心丸的细胞毒性实验

1.7 统计学处理

2 结果

2.1 脐动脉平滑肌细胞培养与鉴定

2.2 各组药物对细胞增殖的影响

2.3 各组药物对VSMC细胞周期分布的影响

2.4 不同浓度麝香保心丸的细胞毒性反应

讨论

结论

附图

参考文献

文献综述

致谢