灿烂弧菌耐药性基因表达调控机制及耐药性逆转研究

目录

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引 言

第一章 绪论

1 灿烂弧菌是刺参腐皮综合症的主要病原菌

2 水产养殖中抗生素的现状及其存在的风险

2.1 水产养殖中抗生素的现状

2.3 水产养殖中使用抗生素带来的风险

2.4 水产养殖中抗生素的替代品

3 细菌ARGs表达的影响因素

3.1 细菌ARGs表达的影响因素

3.2 细菌耐药性与重金属离子Cu2+之间的关系

4 本论文的研究意义

1 实验材料

1.1 实验所用菌株

1.2 主要试剂与仪器

1.3 本实验用到的引物信息

2 实验方法

2.1 菌悬液的制备

2.2 抗生素贮备液的制备

2.4 SDZ对灿烂弧菌生长的影响

2.5 灿烂弧菌降解SDZ测定

2.6 毛细管电泳（CapillaryElectrophoresis, CE）分析

2.7 实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR, qRT-PCR）的样品制备

2.8 qRT-PCR

2.9 实验数据的处理

3 实验结果

3.1 灿烂弧菌的耐药谱

3.2 SDZ对灿烂弧菌生长的影响

3.3 灿烂弧菌不能降解SDZ

3.4 灿烂弧菌通过抗性基因对SDZ产生抗性

4 讨论

5 本章小结

1 实验材料

1.1 实验所用菌株

1.2 主要试剂与仪器

1.3 本实验用到的引物信息

2 实验方法

2.1 重金属对灿烂弧菌生长的影响

2.2 重金属对灿烂弧菌SDZ抗性的影响

2.3 Cu2+对sulVs基因表达的影响

2.4 sulVs基因的启动子分析

2.5 凝胶滞缓实验（Gel electrophoresis shift assay, EMSA）

2.6 Cu2+对sulVs基因表达的调控

2.7 qRT-PCR

3 实验结果

3.1 重金属抑制灿烂弧菌的生长

3.2 重金属影响灿烂弧菌磺胺抗性

3.3 Cu2+影响灿烂弧菌sulVs基因的表达

3.4 sulVs基因的启动子序列

3.5 ArcA与P3启动子的结合能力测定

3.6 Cu2+促进灿烂弧菌产ROS

3.7 Cu2+影响灿烂弧菌arcA基因的表达

3.8 Cu2+通过ROS 途径影响arcA基因的表达

4 讨论

5 本章小结

1 研究总结

2 展望

参考文献

在 学研 究成 果

致谢