重楼多糖对衰老模型小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响

摘要

重楼为百合科重楼属植物，是一种常用中药。研究表明，重楼具有提高免疫力、抗氧化和抑菌等作用。目前国内外对重楼的研究主要集中在重楼皂苷、重楼甾醇的抗肿瘤、免疫调节等方面，对重楼多糖的免疫活性和抗氧化功能的研究较少。本试验利用注射D-半乳糖建立小鼠衰老模型，研究重楼多糖对小鼠免疫功能和抗氧化能力的影响，为寻找和开发更安全、更有效的免疫增强剂和抗氧化剂提供科学依据。　　试验选取7～8周龄、体重25～30 g的健康雌性昆明小白鼠40只，适应性喂养一周后，随机分为4组，每组10只。其中第Ⅰ组为正常对照组(Normal)，每天皮下注射0.2 mL生理盐水(0.9％)并灌胃0.25 mL蒸馏水;第Ⅱ组为模型组(Model)，每天皮下注射0.2 mLD-半乳糖[120 mg/(kg·d)]并灌胃0.25 mL蒸馏水;第Ⅲ组为阳性对照组(Vc)，每天皮下注射0.2 mL D-半乳糖[120 mg/(kg·d)]并灌胃0.25 mL Vc[200 mg/(kg·d)];第Ⅳ组为多糖处理组(PPLPs)，每天皮下注射0.2 mL D-半乳糖[120 mg/(kg·d)]并灌胃0.25 mL重楼多糖[200 mg/(kg·d)]。持续处理42 d，每天观察并记录各组小鼠健康状况。禁食24 h后，称重，用脱颈法处死所有小鼠，采集小鼠脾脏组织。测定小鼠脾脏指数、免疫功能指标(GATA-3、T-bet、IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ及TNF-α mRNA表达)和抗氧化能力指标(CuZn-SOD、Mn-SOD、CAT、GSH-Px、Trx1及Trx2 mRNA表达;T-SOD、CuZn-SOD、CAT、GSH-Px酶活;MDA含量;超氧根阴离子和羟自由基清除能力)。主要研究结果如下:　　1、小鼠衰老模型的建立:正常对照组小鼠每天的饮食与活动正常，毛发光泽度好，皮肤的弹性好;模型组小鼠则表现出精神萎靡，行动缓慢，皮肤松弛、毛发色泽暗淡;而PPLPs组和Vc组小鼠在行动、毛色、皮肤弹性等方面和正常对照组相似，均比模型组好，表明造模成功。　　2.小鼠的脾脏指数:与模型组相比，PPLPs显著提高小鼠脾脏指数(P＜0.05)，并且PPLPs和Vc处理对小鼠脾脏指数的影响无显著差异（P＞0.05）。　　3.小鼠脾脏免疫相关基因mRNA表达水平:PPLPs组小鼠脾脏组织的GATA-3、T-bet、IL-2、IL-4、IL-10、INF-γ及TNF-α mRNA表达水平和正常对照组相似，均显著高于模型组（P＜0.05），PPLPs组和Vc组的免疫相关基因表达均无显著差异(P＞0.05)。　　4.小鼠抗氧化相关基因mRNA表达水平:PPLPs组小鼠脾脏组织的CuZn-SOD、Mn-SOD、CAT、GSH-Px、Trx1及Trx2 mRNA表达水平显著高于模型组(P＜0.05)，PPLPs组和Vc组的抗氧化相关基因mRNA表达水平无显著差异(P＞0.05)，　　5.小鼠抗氧化相关酶活性、MDA含量和脾脏清除超氧根阴离子和羟自由基能力:灌胃PPLPs可以提高小鼠脾脏T-SOD、CuZn-SOD、CAT、GSH-Px酶活（P＜0.05）;显著降低小鼠脾脏组织MDA含量（P＜0.05）;灌胃PPLPs也能显著提高脾脏对超氧根阴离子及羟自由基的清除能力(P＜0.05），且与Vc处理无显著差异(P＞0.05)。　　以上结果表明，灌胃重楼多糖可以显著提高衰老模型小鼠的免疫功能和抗氧化能力。

目录

声明

摘要

第一章 文献综述

1．多糖概述

1．1 多糖的免疫调节作用

1．2 多糖的抗氧化作用

2．重楼概述

2．1 重楼属植物的化学成分

2．2 重楼属植物的生物学活性

3．本研究的目的及意义

第二章 重楼多糖的免疫调节作用

1 材料与方法

1．1 主要材料与试剂

1．2 主要仪器设备

1．3 动物分组和处理

1．4 方法

2 结果

2．1 小鼠衰老模型的建立

2．2 小鼠体重及脾脏指数

2．3 小鼠脾脏组织免疫相关基因表达水平

3 讨论

第三章 重楼多糖的抗氧化作用

1 材料与方法

1．1 主要材料与试剂

1．2 主要仪器设备

1．3 动物分组和处理

1．4 方法

2 结果

2．1 抗氧化相关基因表达

2．2 小鼠脾脏抗氧化酶活性

2．3 小鼠脾脏MDA含量

2．4 脾脏清除超氧根阴离子及羟自由基能力

3 讨论

第四章 结论与创新点

1 结论

2 创新点

参考文献

致谢

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