人过氧化物酶体增殖体激活受体γ2基因克隆及其稳定表达株的鉴定

摘要

人过氧化物酶体增殖体激活受体γ2(hPPARγ2)基因全长cDNA克隆及真核表达载体pcDNA3.1(+)/hPPARγ2的构建。方法匀浆中国汉族人大网膜脂肪垫、提取总RNA，应用RT-PCR方法扩增出hPPARγ2cDNA基因全长。RT-PCR产物经凝胶电泳、割胶纯化后，将纯化的RT-PCR产物用KpnⅠ和XhoⅠ双酶切，与同样经KpnⅠ和XhoⅠ双酶切的pcDNA3.1(+)载体连接形成重组载体pcDNA3.1(+)/hPPARγ2。筛选出阳性克隆，通过限制性内切酶酶切鉴定后对其DNA序列进行测序。结果：从脂肪组织RNA中扩增得到1518bp目的基因片段。重组质粒被限制性内切酶切为两条带，一条为1518bp(hPPARγ2)，一条为5400bp(空载体pcDNA3.1)，片段的大小与理论值相符。RT-PCR扩增的hPPARγ2经荧光测序，其结果与Genbank上hPPARγ2序列完全相同。结论：成功克隆了人PPARγ2基因全长cDNA并成功构建了人PPARγ2的真核表达重组体pcDNA3.1(+)/hPPARγ2。

目录

论文说明：中、英文词对照表

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第一部分 人过氧化物酶体增殖体激活受体Γ2(PPARΓ2)基因克隆及其真核表达载体构建

摘要

1前言

2材料与方法

3 结果

4 讨论

5 结论

参考文献

第二部分HESF细胞人PPARΓ2基因稳定表达克隆筛选及鉴定

摘要

1 前言

2材料与方法

3 结果

4 讨论

5 结论

参考文献

致谢

附录一个人简历

综述核转录因子PPARΓ研究进展

1 PPARΓ简介

2 PPARΓ与脂肪细胞分化及脂代谢

3 PPARΓ与细胞分化

4 PPARΓ与胰岛素抵抗及糖代谢

5 PPARΓ与炎症及动脉粥样硬化

6 问题与展望

参考文献