芍芪多苷对小鼠体液免疫反应的调节作用及部分机制

摘要

白芍总苷(total glucosides of paeony，TGP)和黄芪总皂苷(astragalosides，ASTs)均具有抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。芍芪多苷(shaoqiduogan,SQDG)是一种经过实验筛选并经过严格均匀设计由白芍和黄芪按4：1的比例混合提取的全新药物，单体成分包括芍药苷(paeoniflorin,Pae)与黄芪甲苷(astragaloside IV,ASTⅣ)等，并用高效液相色谱法(high pressure liquid chromatography,HPIC)测定其含量，按照国家新药有关要求制定了科学的质量控制标准。本课题组在以往的实验研究中已经在抗肝损害作用方面对TGP、ASTs、SQDG进行过比较，结果表明，SQDG比TGP、ASTs有更为明显的抗氧化作用，基于对SQDG药理作用的进一步了解前提，作者对SQDG进行了免疫学研究，探讨SQDG在体液免疫调节方面的作用，并与TGP、TGP+ASTs合剂进行比较。 目的：研究SODG对小鼠体液免疫功能的作用及部分机制，并与TGP、TGP+ASTs合剂的体液免疫调节作用进行比较。 方法：采用绵羊红细胞(sheep red blood cell，SRBC)诱导小鼠产生SRBC抗体模型及环磷酰胺(cyclophosphamide，Cy)诱导小鼠免疫增强和抑制模型。SQDG予小鼠连续灌胃7d。采用MTT法检测脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)诱导的小鼠胸腺B淋巴细胞增殖，分光光度法测小鼠血清半数溶血值(calculation of 50％hemolysinvalue，HC50)和小鼠脾细胞IgM抗体生成水平，探讨SQDG的部分作用机制，比较SQDG和TGP、TGP+ASTs合剂对各个模型体液免疫调节作用的差异。 结果：1，SQDG(120 mg·kg-1)灌胃给药7天能提高正常小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清HC50、脾脏B细胞增殖、脾细胞IgM抗体生成水平，SQDG(30.60，120 mg·kg-1)对Cy(150 mg·kg-1，d0)诱导的免疫低下小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清HC50、脾脏B细胞增殖、脾细胞IgM水平有明显的恢复作用，SQDG(30，60，120 mg·kg-1)对Cy(250 mg·kg-1，d-3)诱导的免疫亢进小鼠的胸腺指数、脾脏指数、血清HC50、脾脏B细胞增殖、脾细胞IgM水平有下调作用。 2，SQDG(120 mg·kg-1)提高正常SRBC小鼠的脾脏指数，血清HC50、脾脏B细胞增殖、脾细胞IgM的作用显著优于TGP(140 mg·kg-1)、TGP+ASTs(26.25+3.75，52.5+7.5，105+15mg·kg-1)。SQDG(30，60，120 mg·kg-1)提高Cy诱导的免疫低下SRBC小鼠各指标的效果比TGP(35，70，140mg·kg-1)、TGP+ASTs(26.25+3.75，52.5+7.5，105+15mg·kg-1)效果明显。SQDG(30，60，120 mg·kg-1)对cy诱导的免疫亢进SRBC小鼠各项指标的下调作用比TGP(35，70，140mg·kg-1)、TGP+ASTs(26.25+3.75，52.5+7.5，105+15mg·kg-1)更为显著。 结论：SQDG对小鼠体液免疫反应具有双向调节的作用，其效果与相似剂量的TGP、TGP+ASTs合剂相比具有显著优势。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

摘要

1前言

2实验材料

2.1动物

2.2药物与试剂

2.3仪器与设备

3实验方法

3.1 SRBC诱导抗体溶血素生成模型的建立

3.2 Cy诱导的小鼠免疫低下模型的建立

3.3 Cy诱导的小鼠免疫亢进模型的建立

3.4实验分组与给药方案

3.4.1 正常小鼠的SRBC诱导抗体溶血素生成模型组

3.4.2 Cy诱导的小鼠免疫抑制模型组

3.4.3 Cy诱导的小鼠免疫亢进模型组

3.5指标检测方法

3.5.1小鼠胸腺指数，脾脏指数的测量

3.5.2血清半数溶血值(HC50)的测定

3.5.3脾细胞IgM抗体的诱生与检测

3.5.4 MTT法测LPS诱导的B细胞增殖测定

3.6统计处理

4结果

4.1SQDG对正常小鼠体液免疫的影响

4.1.1 SQDG对正常小鼠胸腺指数和脾脏指数的影响

4.1.2 SQDG与TGP、TGP+ASTs对正常小鼠胸腺指数和脾脏指数影响的比较

4.1.3 SQDG对正常SRBC小鼠模型血清半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体的的影响

4.1.4 SQDG与TGP、TGP+ASTs对正常SRBC小鼠模型血清半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体影响的比较

4.2 SQDG对Cy诱导的免疫低下小鼠体液免疫的影响

4.2.1 SQDG对Cy诱导的免疫低下小鼠胸腺指数和脾脏指数的影响

4.2.2 SQDG与TGP、TGP+ASTs对Cy诱导的免疫低下小鼠胸腺指数和脾脏指数影响的比较

4.2.3 SQDG对Cy诱导的免疫低下小鼠血清半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体的影响

4.2.4 SQDG与TGP、TGP+ASTs对Cy诱导的免疫低下小鼠血清半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体影响的比较

4.3 SQDG对Cy诱导的免疫亢进小鼠体液免疫功能的影响

4.3.1 SQDG对Cy诱导的免疫亢进小鼠胸腺指数和脾脏指数的影响

4.3.2 SQDG与TGP、TGP+ASTs对Cy诱导的免疫亢进小鼠胸腺指数和脾脏指数影响的比较

4.3.3 SQDG对Cy诱导的免疫亢进小鼠血清半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体的影响

4.3.4 SQDG与TGP、TGP+ASTs对Cy诱导的免疫亢进小鼠半数溶血值HC50、B细胞增殖和脾细胞IgM抗体影响的比较

5.讨论

5.1 SQDG对小鼠体液免疫的影响

5.2 SQDG与TGP、TGP+ASTs合剂对小鼠体液免疫影响的比较

6.小结

7.本研究的创新点

参考文献

个人简历

致谢

综述：体液免疫失调所致自身免疫疾病的发病原理以及白芍和黄芪对体液免疫的调节作用及其部分作用机制