雄甾-4-烯-3,17-二酮(4AD)和阿维菌素生物转化研究

目录

缩略词

第一章 文献综述

1.1 生物转化

1.2 生物转化法的主要反应类型

1.2.1.羟基化反应

1.2.2 糖基化反应

1.2.3 氧化还原反应

1.2.4 水解反应

1.2.5 环氧化反应

1.3 生物转化的主要方法和主要研究方向

1.3.1生物转化的主要方法

1.3.2生物转化系统究的主要方向

1.4 雄甾-4-烯-3，17-二酮简介

1.4.1 甾体药物的概述

1.4.2 雄甾-4-烯-3，17-二酮及微生物转化

1.4.2 雄甾-4-烯-3，17-二酮微生物合成

1.5 阿维菌素及长春花悬浮细胞转化体系

1.5.1阿维菌素化学性质

1.5.2阿维菌素的发展

1.5.3长春花悬浮细胞体系的生物转化

1.7本论文的立题依据

第二章 雄甾-4-烯-3，17-二酮(4AD)生物转化菌的筛选

2.1实验用材料与仪器

2.1.1材料

2.1.2试剂与仪器

2.2.1 底物的配置

2.2.2 PDA平板培养基（g/L）

2.2.3 种子培养基和转化培养基（g/L）

2.2.4 改良硫酸香兰素

2.3.1 4AD转化菌初筛原理

2.3.2 4AD转化菌初筛

2.3.3 薄层色谱 (TLC)检测

2.3.4 高效液相色谱 (HPLC)检测

2.3.5 雄甾-4-烯-3，17-二酮(4AD)转化菌复筛

2.4 雄甾-4-烯-3，17-二酮(4AD)生物转化结果

2.4.1 4AD薄层色谱分析

2.4.2 4AD高效液相色谱分析

2.4.3 4AD转化筛菌结果

2.5 扩大培养获得转化产物

2.5.1 PDA平板培养基（g/L）

2.5.2 种子培养基和转化培养基（g/L）

2.5.3 扩大培养方法

第三章 转化产物的分离纯化和结构鉴定

3.1转化产物的分离

3.2 转化产物的精制

3.2.1 粗品IA2-1的精制

3.2.2 粗品IA2-2的精制

3.2.3 粗品IA2-3的精制

3.3 转化产物的理化性质及化学结构解析

3.3.1 IA2-1 化学结构解析

3.3.2 IA2-2 化学结构解析

3.3.3 IA2-3 化学结构解析

3.3.4 转化产物得率的初步统计

3.4 IA2真菌转化条件的考察

3.4.1 IA2菌株生长曲线的测定

3.4.2 底物浓度对转化率的影响

3.4.3 底物转化时间对转化率的影响

3.4.4 培养基初始pH值对转化率的影响

3.4.5 葡糖糖浓度的变化对转化率的影响

3.5 小结

第四章 IA2真菌的鉴定

4.1 菌种

4.2 主要设备和仪器

4.3 试验试剂和酶

4.4 菌种鉴定方法

4.4.1 形态鉴定

4.4.2 分子鉴定

4.5 结果与分析

4.5.1 菌株IA2的菌落特征

4.5.2 菌株IA2的微观形态特征

4.5.3 18SrDNA基因PCR克隆与序列分析

4.5.4ITS及5.8S rDNA的琼脂糖凝胶和基因测序

4.5.5 菌株分子系统化发育树构建与分析

4.6 讨论

第五章 长春花悬浮细胞对阿维菌素的生物转化

5.1实验用材料与仪器

5.1.1材料

5.1.2试剂和仪器

5.2阿维菌素转化的实验方法

5.2.1 底物的配置

5.2.2 MS液体培养基（1L）

5.2.3长春花悬浮细胞体系的建立