类风湿关节炎患者转运蛋白基因多态性与甲氨蝶呤疗效及不良反应的相关性研究

摘要

背景：类风湿关节炎(RA)是最常见的炎性关节炎，影响世界上0.5％～1.0％的人群.中国人群发病率约为0.3％。甲氨蝶呤(MTX)具有抗增殖作用，近20年多年来，作为改善病情抗风湿药(DMARDS)治疗RA和其它多种风湿性疾病。低剂量MTX治疗RA的主要障碍是它的无效或/和毒性，约30％的RA病人对MTX治疗反应不良，10％～30％的病人因不良事件而中止治疗。近年来研究多集中在基因多态性对MTX的疗效和毒性的预测可能性上。叶酸代谢途径及甲氨蝶呤转运体的基因多态性尤其值得关注。转运体在药物吸收、分布和排泄中起着重要的作用。转运体主要有两类：三磷酸腺苷结合盒转运体（ATP－binding cassette ABC转运体）和溶质蛋白转运体家族（SLC）。甲氨蝶呤进入细胞通过还原型叶酸载体(reduced folate carrier 1 ,RFC-1)介导的主动转运机制实现，其流出细胞通过ABC转运体家族成员完成。目前国外研究最多的有关RA患者对MTX疗效及不良反应的转运蛋白基因为：ABCB1和RFC-1，但研究结果报道不一致，原因可能与样本量小及种族差异等有关。国内目前无相关研究，为了解中国RA患者ABCB1和RFC-1基因多态性与MTX疗效和安全性的关系，拟采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法检测本地区RA患者RFC-1 G80A及ABCB1 C3435T多态性，研究其与MTX疗效及不良反应的相关性，为个体化用药提供帮助。
　　 目的：研究RFC-1基因G80A（rs1051266）及ABCB1基因C3435T（rs1045642）单核苷酸多态性（SNP)在正常人群和RA患者中的分布情况,RA患者MTX治疗反应,探讨此两种SNP与RA患者使用MTX治疗的疗效和不良反应的相关性。
　　 方法：选择本院门诊和住院中单用MTX的RA患者151例，其中男性 36例，女性 115例，年龄20～77岁，平均（51.11±13.24）岁，病程0.8～30年，平均（7.25±5.36）年，均符合美国风湿病学会（ACR）1987年RA分类标准。分别于治疗0周、12周、24周随访患者临床及实验室指标，评价疗效及不良反应。同时收集我院200例体检中心健康体检者作为健康对照组。采用FQ－PCR方法检测RA患者及200例正常对照组的RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性，比较两组间基因型分布及等位基因频率分析其与MTX疗效及不良反应的相关性。
　　 结果：⑴RA与正常对照组RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的基因型分布及等位基因频率差异无统计学意义（P>0.05）。⑵单用MTX治疗者中，ABCB1基因C3435T的多态性与疗效相关，携带有CC基因型的患者MTX疗效明显优于携带有TT或CT基因型的患者，差异有统计学意义（P<0.05）。而RFC-1基因G80A的多态性与疗效无明显相关。⑶单用MTX治疗者中，RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性均与药物的不良反应无明显相关。⑷单用MTX治疗者中，RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的基因型在有及无胃肠道反应组分布差异无统计学意义（P>0.05）。⑸RA患者疾病活动性评分在携带不同RFC-1或ABCB1基因型的人群中差异无统计学意义（P>0.05）。
　　 结论：①RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性与RA的发病无关。②ABCB1基因C3435T的多态性与MTX的疗效相关。③RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性均与MTX的不良反应无关。④RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性与MTX的胃肠道反应无关。⑤RFC-1基因G80A及ABCB1基因C3435T的多态性与RA疾病活动度无关。