微透析法研究盐酸氨溴索对莫西沙星在肺炎链球菌肺炎大鼠肺部的药动学影响

摘要

社区获得性肺炎(CAP)是全球范围内最常见的感染性疾病之一，发病率和死亡率均很高，严重威胁全人类的健康，特别是对于老年人群以及儿童患者。在全世界多个国家和地区的大规模研究结果提示CAP中最常见的病原体为肺炎链球菌(S.p)，虽然，近几十年抗菌药物发展迅速，但是其导致的死亡率并未见明显下降，甚至在部分地区呈现上升趋势，从侧面也进一步反映了肺炎链球菌对于青霉素、大环内酯类等推荐使用的抗菌药物耐药问题日益严重，也进一步增加了治疗难度、治疗成本和患者的死亡率。目前，国内外CAP的治疗指南除了仍然推荐青霉素以及大环内脂类药物作为首选药物外，美国IDSA建议对于门诊以及住在普通病房的CAP患者，喹诺酮类抗菌药物可以作为首选药物单独用于治疗，但是应使血药浓度尽可能长时间保持在防耐药突变浓度(MPC)之上，在确保疗效的同时，更应注意减少耐药突变体的出现。对莫西沙星相应的临床对照研究已经证实了其在CAP中的疗效，在体外实验中更表现出了对肺炎链球菌比左氧氟沙星更强的抗菌活性，从而能更快速的杀灭细菌和更快速的改善患者临床症状。　　对于莫西沙星治疗肺炎链球菌肺炎，国内外各个指南的推荐剂量均为400 mg/日，并且口服与静脉给药疗效上未见明显差异。盐酸氨溴索作为一种常用的化痰药物，广泛用于各种呼吸道感染。国内外多个研究表明盐酸氨溴索在体内的药动学与药物剂量密切相关，在体内药物浓度达到一定量时发挥抗炎以及协同作用，但是临床使用时对于剂量的选择存在着一定的争议，对于抗菌药物协同作用的最佳剂量仍未明确。相关小样本临床研究提示大剂量盐酸氨溴酸联合抗菌药物治疗肺炎时疗效明显优于抗菌药物单独使用以及小剂量联合应用。但是，莫西沙星联合盐酸氨溴索给药时，盐酸氨溴索对于莫西沙星肺部的药动学特点是否有影响、最佳剂量是多少均未见研究报道。　　既往抗菌药物的药动学研究常常依赖于血浆或肺组织匀浆中的数据。但是，在感染部位上皮细胞衬液、肺泡巨噬细胞中的游离药物浓度往往明显影响着抗菌的疗效。微透析(MD)技术可在基本不干扰生物体内正常代谢过程的情况下，进行实时、在线连续以及同步多器官取样，是研究药物组织分布、药物组织穿透力情况及监测药物有效活性物质的安全简单可靠的方法。但是，在肺组织中使用微透析进行药物浓度研究的报道较少。　　一、目的　　采用微透析采样技术同步采集并测定莫西沙星在肺炎链球菌肺炎模型大鼠血浆以及肺组织中的药物浓度，探索其药动学特点，以及不同剂量盐酸氨溴索对其药动学的影响，为临床合理用药提供循证学依据。　　二、方法　　1、取WISTAR大鼠24只，SPF级，体重220g～250g，雄性，随机分为A、B、C、D4组。　　2、将大鼠颈部切开，通过气管穿刺向肺内注入3麦氏单位浓度肺炎链球菌悬液0.2ml（1.8×108CFU/只），建立大鼠肺炎链球菌肺炎模型。　　3、莫西沙星成人推荐常用剂量为400mg/d，经体表面积法折算后大鼠给药量为40mg/kg;盐酸氨溴索给药剂量按成人剂量60mg、120mg以及600mg，折算为大鼠给药剂量6mg/kg、12mg/kg以及60mg/kg。所有大鼠均灌胃给药莫西沙星，A组联合灌胃生理盐水1ml，其余三组联合灌胃给药盐酸氨溴索。　　4、采用微透析采样技术同步采集大鼠血液以及肺组织间液透析液样本，所有透析液样品采用HPLC-MS法测定药物浓度，根据非房室模型计算药动学数据。　　三、结果　　1、A组（莫西沙星单药组）:莫西沙星在血液中tmax为1.00±0.00h，Cmax为4.84±0.05μg/mL。肺组织内tmax为0.95±0.10h，Cmax为4.84±0.02μg/mL。t1/2血液内为2.16±0.12h，肺组织内为3.27±0.48h。血液及肺组织的AUC(0-t)分别为12.85±1.46h·μg/mL和13.22±0.62h·μg/mL。莫西沙星在肺组织及血液中的分布系数（AUC肺/AUC血液）为1.10±0.041。　　2、B组（低剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星组）:莫西沙星在血液中tmax为0.83±0.17h，Cmax为5.13±1.20μg/mL;肺组织内的tmax为0.83±0.17h，Cmax为5.58±0.17μg/mL;消除半衰期t1/2在血液内为3.78±3.02h，肺组织内为3.16±1.39h。血液及肺组织的药-时曲线下面积AUC(0-t)分别为12.66±1.20h·μg/mL和13.78±3.30h·μg/mL。莫西沙星在肺组织及血液中的分布系数（AUC肺/AUC血液）为1.14±0.47。　　3、C组（中剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星组）:莫西沙星在血液中达峰时间（tmax）为1.00±0.00h，Cmax为4.76±0.43μg/mL;肺组织内的tmax为0.89±0.10h，Cmax为7.26±1.69μg/mL。消除半衰期t1/2在血液内为4.98±1.81h，肺组织内为4.47±3.38h。血液及肺组织的药-时曲线下面积AUC(0-t)分别为15.54±3.26h·μg/mL和18.64±6.14h·μg/mL。莫西沙星在肺组织及血液中的分布系数(AUC肺/AUC血液)为1.15±0.88。　　4、D组（高剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星组）:莫西沙星在血液中达峰时间(tmax)为0.94±0.1h，Cmax为4.68±0.18μg/mL;肺组织内的tmax为0.89±0.19h，Cmax为7.84±2.34μg/mL。消除半衰期t1/2在血液内为4.12±1.83h，肺组织内为3.9±1.19h。血液及肺组织的药-时曲线下面积AUC(0-t)分别为16.46±1.31h·μg/mL和22.00±4.78h·μg/mL。莫西沙星在肺组织及血液中的分布系数（AUC肺/AUC血液）为1.29±0.34。　　5、其中D组中莫西沙星在肺内AUC(0-t)（22.00±4.78h·μg/mL）、Cmax（7.84±2.34μg/mL）均高于A组和B组。　　四、结论　　1、口服莫西沙星在肺炎链球菌肺炎大鼠模型中吸收迅速，消除缓慢，其在血液及肺组织内的浓度同步性良好，提示其有较强的肺组织穿透力、组织分布系数高、生物利用度良好。　　2、在肺炎链球菌肺炎大鼠模型中，联合使用不同剂量盐酸氨溴索时，莫西沙星在肺组织中均有较强的穿透力、较高的分布系数，药物曲线下面积达到甚至超过血液中的曲线下面积。　　3、当莫西沙星联合盐酸氨溴索时，其在肺组织中的游离药物浓度与盐酸氨溴索剂量呈正相关，而血浆中的浓度未受明显影响。　　4、高剂量盐酸氨溴索能显著增加莫西沙星在大鼠肺组织内的浓度及其生物利用度。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

前言

材料和方法

一、实验动物和试剂器材

二、实验步骤和方法

三、数据处理及统计分析

实验结果

一、盐酸莫西沙星色谱条件方法学验证

二、莫西沙星单药组实验结果

三、低剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星

四、中剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星

五、高剂量盐酸氨溴索联合莫西沙星

六、不同剂量盐酸氨溴索时，莫西沙星药动学比较

讨论

结论

参考文献

综述 肺炎链球菌肺炎抗菌药物治疗及其PK／PD研究进展

参加科研工作情况和在读期间发表论文

致谢