胰腺癌患者外周血和肿瘤组织KRAS基因突变的研究

摘要

目的：
　　1、利用高分辨率熔解曲线(HRM)法检测30例胰腺癌患者外周血和30例胰腺癌肿瘤组织中KRAS基因突变,其中13例胰腺癌外周血及肿瘤组织配对,分析KRAS基因突变与患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤部位、大小、分期、病理类型之间的关系。
　　2、通过HRM法检测出胰腺癌患者外周血及肿瘤组织中KRAS基因突变率,对比二者突变一致性,探讨胰腺癌外周血替代肿瘤组织检测KRAS基因突变的可行性,为胰腺癌患者提供一种标本容易获取、可以动态监测KRAS基因突变状态、对患者创伤较小、适于临床推广的KRAS基因检测方法。
　　3、探讨HRM法检测胰腺癌外周血标本KRAS基因突变的敏感性及可行性。
　　方法：
　　1、收集整理2011年7月-2012年11月经细胞学或病理学确诊为胰腺癌患者的外周血30例,肿瘤蜡块组织25例,胰腺癌新鲜组织5例,其中13例胰腺癌外周血及肿瘤组织配对,利用HRM法检测KRAS基因突变情况,并分析KRAS基因突变与患者临床病理特征的关系。
　　2、对13例外周血和肿瘤组织配对样本的检测结果进行分析,分析其KRAS基因突变的一致性,探讨用HRM法检测外周血KRAS基因突变的敏感性及可行性。
　　结果：
　　1、胰腺癌患者外周血及肿瘤组织KRAS基因突变率及突变一致性
　　30例胰腺癌外周血标本中检测出15例KRAS基因发生突变,突变率为50％,30例胰腺癌组织标本中检测出21例KRAS基因发生突变,突变率为70%;外周血和肿瘤组织配对的13例标本中,二者同时发生突变者为5例,以组织KRAS基因突变为标准,两者突变一致性为62.5%(5/8),一致性具有统计学意义,经直接测序法验证同时发生突变的外周血及组织的突变位点一致。
　　2、胰腺癌患者外周血及肿瘤组织KRAS基因突变与胰腺癌患者临床病理特征的关系
　　(1)胰腺癌患者外周血中的KRAS基因突变率在男性组为52.9%(9/17),女性组为46.2%(6/13);≥60岁组为61.1%(11/18),<60岁组为33.3%(4/12);吸烟组为55.6%(5/9),不吸烟组为47.6%(10/21);胰头肿瘤组为38.1%(8/21),非胰腺头部肿瘤组为77.8%(7/9);Ⅰ~Ⅱ期组为52.9%(9/17),Ⅲ~Ⅳ期组为46.2%(6/13);胰腺癌外周血中KRAS基因突变与患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤的部位、肿瘤分期等无关(P>0.05);
　　(2)胰腺癌患者肿瘤组织中的KRAS基因突变率在男性组为82.6%(19/23),女性组为28.6%(2/7);≥60岁组为66.7%(8/12),<60岁组为72.2%(13/18);吸烟组为80.0%(8/10),不吸烟组为65.0%(13/20);胰头肿瘤组为76.5%(13/17),非胰腺头部肿瘤组为61.5%(8/13);Ⅰ~Ⅱ期组为63.6%(14/22),Ⅲ~Ⅳ期组为87.5%(7/8);癌细胞高分化组为61.5%(8/13),低分化组为76.5%(13/17);胰腺癌肿瘤组织中的KRAS基因突变男性高于女性(P<0.05),但与患者的年龄、吸烟史、肿瘤的部位、癌细胞分化程度、分期等均无关系(P>0.05)。
　　结论：
　　1、胰腺癌外周血和肿瘤组织中均具有较高的KRAS基因突变,且胰腺癌外周血中KRAS基因突变与患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤的部位、肿瘤分期等无关;胰腺癌肿瘤组织中的KRAS基因突变可能与患者的性别有关(男性高于女性),但与患者的年龄、吸烟史、肿瘤的部位、癌细胞分化程度、分期等均无关系。
　　2、HRM法可以敏感的检测出胰腺癌外周血中KRAS基因的突变率,其与配对肿瘤组织中KRAS基因的突变一致性高,为外周血代替肿瘤组织检测KRAS突变提供了依据,同时HRM法操作简便、低成本、低污染,适于临床推广。利用胰腺癌外周血进行KRAS基因突变检测采集方便,对患者创伤较小,并且可以动态监测KRAS基因突变状态。

目录

封面

声明

目录

英文缩略词表(Abbreviation)

中文摘要

英文摘要

1. 引言

2. 材料和方法

2.1实验材料

2.2研究对象和方法

2.3试验流程图

3. 结果

3.1入组患者临床资料的整理与分析

3.2胰腺癌外周血、石蜡切片组织、肿瘤新鲜组织提取的DNA浓度监测结果

3.3高分辨率熔解曲线分析结果

3.4测序结果

3.5胰腺癌患者外周血与肿瘤组织KRAS基因突变及与临床特征关系

4．讨论

5．结论

参考文献

附 录

1．个人简历

2．发表的文章

致谢

综 述