检测血清吲哚胺2,3-双加氧酶在溃疡性结肠炎中的临床价值研究

摘要

研究背景：炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)是一种病因和发病机制尚不明确的慢性非特异性肠道炎症性疾病,目前大多数学者将其归结为自身免疫性疾病,它包括溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)和克罗恩病(crohn‘s disease,CD),临床上UC较CD更多见。UC病变主要累及结肠黏膜和黏膜下层,病变范围多从直肠及远段结肠开始,可逆性向近端发展,甚至累及全结肠及末端回肠,呈连续性分布,临床主要表现为腹泻、腹痛和黏液脓血便。目前对UC的诊断主要依据患者的临床表现、内镜检查、病理结果和实验室检查结果进行综合判断,各国学者试图从免疫因素、遗传因素、环境因素等各方面解释该病的发病机制,但至今尚无学说能明确阐明UC的具体病因和发病机制,给临床对该病的诊断及治疗带来困扰。当前,越来越多的证据表明慢性炎症性肠病是由于对―自体‖肠道内共生菌的免疫耐受被打破所致,当IBD发生时,参与适应性免疫的辅助性T细胞活化并分泌大量炎症介质,从而导致炎症发生。吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)是一种重要的免疫调节酶,可以催化色氨酸(tryptophan,TRP)分解代谢产生犬尿氨酸(kynurenine,KYN),其广泛分布于胃肠道内,可以被炎症细胞分泌的炎症介质诱导产生,并发挥其抑制 T细胞增殖活化从而促进免疫耐受的作用,减轻组织炎症损伤。因此IDO与UC的发病机制关系密切。血清IDO变化与UC的关系尚不明确,需更多深入的研究来阐述IDO在UC中的作用。
　　目的：通过检测吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在溃疡性结肠炎(UC)患者肠黏膜组织中的表达,以及检测IDO和IDO活性在UC患者血清中的水平,探讨其在UC发病过程中发挥的作用及相关的临床意义。
　　方法：选取临床表现、内镜检查、病理结果符合2012年炎症性肠病诊断与治疗共识意见的溃疡性结肠炎患者60例作为UC组,收集UC患者的肠黏膜标本和血清标本。选取健康体检中心体检结果为正常的健康人20例作为正常对照组,收集正常对照组的血清标本。分别用ELISA法检测两组血清中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)和C反应蛋白(CRP)的水平;高效液相色谱法(HPLC)检测两组血清中色氨酸(TRP)、犬尿氨酸(KYN)的水平,并计算犬尿氨酸/色氨酸比率,即 IDO活性;免疫组化法检测UC组肠黏膜中IDO的表达情况。比较两组血清中IDO水平、IDO活性的不同,分析UC组中血清IDO水平、IDO活性与肠黏膜IDO表达量、疾病活动程度、CRP的关系,利用受试者工作特征(ROC)曲线分析IDO水平、IDO活性和CRP水平诊断活动期UC的价值。
　　结果：①UC组中,血清 IDO水平、IDO活性与肠黏膜中 IDO表达量呈正相关(r=0.860,r=0.809,P<0.01)。②与正常对照组相比,UC组血清IDO水平、KYN水平、CRP水平、IDO活性升高(P<0.05)。③UC组中,与缓解期患者相比,活动期患者血清IDO水平、KYN水平、CRP水平、IDO活性较高,并随炎症严重程度升高而升高(P<0.05),TRP水平在各期UC中无明显差别(P>0.05)。④活动期UC患者中,血清IDO水平、IDO活性与疾病活动度呈正相关(r=0.841,r=0.809,P<0.01),与CRP水平亦呈正相关(r=0.723,r=0.729,P<0.01)。⑤IDO水平、IDO活性、CRP水平的ROC曲线下面积分别为0.976,0.856和0.864;最佳截断值分别为53.662U/L,52.10和1.755mg/ml;灵敏度分别为90.5％,81.0%和100.0%;特异度分别为94.4%,83.3%和61.1%;Youden指数分别为0.8492,0.6430和0.6111,IDO水平诊断活动期UC的价值较IDO活性、CRP水平高。
　　结论：(1)与正常对照组相比,血清IDO水平、CRP水平和IDO活性在UC患者中显著升高,可在UC的鉴别诊断中发挥重要作用;(2)UC组中IDO水平、IDO活性与肠黏膜IDO表达量、疾病活动程度、CRP水平呈正相关,可作为反映肠道炎症严重程度的血清指标;(3)血清 IDO水平、CRP水平、IDO活性对活动期UC具有重要的诊断价值,其中IDO水平的诊断价值高于CRP和IDO活性。(4)与HPLC检测IDO活性相比,ELISA检测IDO水平方法更为简便,对活动期UC的诊断价值更高,并且亦能够反映疾病严重程度,其在临床上利用价值更高,有望可以替代HPLC检测IDO活性,在临床上推广应用。

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1 前言

2 材料与方法

2.1 研究对象

2.2 方法

3 结果

3.1 一般资料

3.2 UC组肠黏膜中IDO的表达情况

3.3 UC组血清IDO水平、IDO活性与肠黏膜IDO表达的关系

3.4 血清IDO、KYN、TRP、CRP水平、IDO活性在各组中的比较

3.5 活动期UC中血清IDO水平、IDO活性与CRP水平、疾病活动评分的关系

3.6 IDO水平、IDO活性、CRP水平诊断活动期UC的ROC曲线分析

3.7 IDO水平对UC轻、中、重度诊断的最佳阈值

4 讨论

5 结论

参考文献

附录

致谢