跨膜丝氨酸蛋白酶4在胃癌组织中表达及其临床意义

摘要

背景与目的：胃癌是一种高度恶性的疾病，并被认为是由遗传、表观遗传和环境影响等多种因素引起的，其低诊断率、低手术切除率是胃癌患者预后不良的主要原因。许多已被开发的用于判断，治疗和及判定预后生物学标志物，例如血清癌胚抗原（CEA）和胃癌组织HER2表达已被建议作为胃癌标志物并用于临床实践。然而，它们的低灵敏度和低特异性限制了其应用。诊断标志物，预后指标及有效的治疗靶点的缺乏仍然是胃癌临床诊疗以及预后效果不佳主要因素。因此，继续深入对GC的发病机制研究，以便发现和开发针对胃癌的新型的诊断和预后的分子标志物，对于提高胃癌患者生活和生存质量是目前亟需解决的问题。探索跨膜丝氨酸蛋白酶4（Transmembrane protease, serine4 TMPRSS4）在胃恶性肿瘤中表达水平及其与GC患者临床病理学特征的相互关系，分析TMPRSS4蛋白表达水平与GC患者预后生存的影响，以期寻找GC新型的生物学标志物。
　　方法：
　　1.收集2014.7-2015.2间41例在安徽省立医院明确诊断为GC(术前胃镜及病理活检或术后病理确诊)并接受标准胃癌切除术（D2）的患者的新鲜组织标本，留取一定量癌变组织及癌旁胃粘膜（癌旁组织定义：距癌肿≧5 cm的正常胃粘膜组织），装入已编号的灭菌冻存管，迅速转移放入安徽省立医院普外科实验室-80℃深低温冰柜中储存，运用RT-qPCR方法检测TMPRSS4 mRNA在胃癌及癌旁组织中的表达丰度。
　　2.选取2010.7.1到2012.7.1之间在安徽省立医院明确诊断为GC并接受胃恶性肿瘤根治性切除术的患者115例，所有标本在手术切除半小时内及时放入固定液中（4%甲醛）、留取一定量癌变组织及癌旁组织,进行免疫组化实验，检测 TMPRSS4在癌组织及癌旁组织中的的表达水平；分析其表达与GC患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌组织分化程度、淋巴结转移数、及肿瘤TNM分期等临床病理学特征的关系。
　　3.通过电话及门诊随访获取―2‖中115例胃癌患者的临床预后信息例如肿瘤复发、患者死亡等患者相关预后资料，使用Kaplan-Meier曲线分析TMPRSS4蛋白的异常表达与胃癌患者总生存期（Overall survival OS）的相互关系，运用单因素分析方法及 Cox回归多因素分析模型明确患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌组织分化程度、淋巴结转移数、及肿瘤TNM分期等临床病理学特征与胃癌患者TMPRSS4蛋白表达丰度等变量间的相关性。
　　结果：
　　1.RT-qPCR结果提示TMPRSS4 mRNA在GC患者癌变部位表达量显著高于其匹配癌旁组织中的表达水平，差异有统计学意义0.86±0.31vs0.41±0.15，P<0.05）。
　　2.免疫组化结果显示:TMPRSS4在胃癌组织中阳性表达是70.4%（81／115）,显著高于其在良性组织中的阳性表达率19.5%（9/41），差异有统计学意义(P<0.001).
　　3.临床资料分析:高表达TMPRSS4与胃肿瘤的分化程度、转移淋巴结数及临床分期（TNM法）显著相关（均P＜0.001），而与患者年龄、性别、肿瘤大小等无明显相关。
　　4.TMPRSS4是GC患者OS及DFS独立影响因素，能在一定程度上预测GC患者预后情况。
　　结论：TMPRSS4在胃癌组织中的高表达与胃癌患者的分化程度低、转移淋巴结数多，及较高的临床分期等相关临床病理特征密切相关，TMPRSS4有可能作为一个新型的的胃癌的生物标志物，有可能预测GC患者的预后。

目录

声明

英文缩略词

1.前言

2.材料与方法

2.1 病人和组织标本

2.2 主要试剂与仪器

2.3 RT-qPCR步骤

2.4免疫组织化学染色技术及其判断标准

2.5数据分析

3. 结果

3.1临床资料分析：

3.2 TMPRSS 4 mRNA在GC患者肿瘤组织的表达情况

3.3 TMPRSS 4蛋白在胃癌组织和癌旁组织中的表达

3.4 TMPRSS 4蛋白表达水平与胃癌病理学特征

3.5 TMPRSS 4蛋白表达水平与胃癌患者预后的关系

4讨论

4.1.胃癌诊治概述

4.2. II型跨膜丝氨酸蛋白酶概述

4.3 TMPRSS 4 与肿瘤

5. 结论：

参考文献

附录个人简历

致谢

综述:Tmprss 4在肿瘤中的研究进展