一种含单跨膜区的膜蛋白其跨膜区的纯化方法

摘要

本发明公开了一种含单跨膜区的膜蛋白其跨膜区的纯化方。它是在含单跨膜区的膜蛋白的N或C端加入多聚组氨酸标签，然后将此含组氨酸标签的含单跨膜区的膜蛋白的编码基因转入到表达质粒中，再将表达质粒转入表达菌中，培养表达菌并诱导含单跨膜区的膜蛋白的表达，将表达菌破碎，并用含尿素和变性剂的缓冲液将含单跨膜区的膜蛋白溶解，在有尿素的情况下利用组氨酸标签对单跨膜区的膜蛋白进行纯化，并同时用再折叠剂使单跨膜区的膜蛋白再折叠并去除尿素，获得折叠的单跨膜区的膜蛋白。采用直接加入尿素法溶解目标蛋白，不需要收集细胞包涵体，既节约时间，也提高目标蛋白的产量。