鼻咽癌组织中EBV潜伏膜蛋白2跨膜区CTL表位序列分析

摘要

背景与目的:Epstein-Barr病毒在华南地区鼻咽癌细胞中表达核抗原1(EBNA1)、潜伏膜蛋白1(LMP1)和潜伏膜蛋白2(LMP2)等病毒蛋白质.LMP2mRNA不仅几乎100%表达于鼻咽肿瘤细胞,而且LMP2蛋白还具有较强的免疫原性,是一个较理想的免疫治疗靶点.本研究分析广州地区来源鼻咽癌组织的LMP2基因跨膜区的CTL表位序列,为设计以LMP2抗原为靶点的鼻咽癌免疫治疗提供依据.方法:收集广州地区鼻咽癌患者鼻咽活检组织20例和正常鼻咽粘膜活检组织3例,提取DNA,半巢式PCR扩增LMP2基因跨膜区,直接测序,分析CTL表位序列.结果:与标准株B95.8相比,鼻咽癌和正常鼻咽粘膜活检组织来源的LMP2基因跨膜区存在14处碱基替换,形成6处氨基酸替换,导致4处CTL表位序列变异(SSC、TYG、CLG和VMS),其中VMS多态性为初次报道.由于从鼻咽癌组织扩增的LMP2序列与从正常鼻咽粘膜扩增的LMP2序列相同,表明这些变化是地域相关的病毒多态性而非鼻咽癌相关的病毒变异.结论:广州地区来源的Epstein-Barr病毒LMP2基因存在多态性,产生4处CTL表位序列变化.在设计以LMP2为靶点的免疫治疗时,应充分考虑病毒基因多态性的影响.