子宫内膜异位症影响妊娠的相关因素分析及动物模型的建立

摘要

1.目的
　　探索子宫内膜异位症（EMS）对不孕患者经体外受精-胚胎移植（IVF-ET）治疗后妊娠结局的影响及妊娠相关因素的分析；并以小鼠为实验对象，通过手术造模，探索子宫内膜异位症小鼠模型成模状态最佳的时间，为以后相关研究提供参考，并为研究子宫内膜异位症对小鼠胚胎的影响做准备。
　　2.方法
　　2.1、临床研究：
　　选择自2012年1月至2016年6月在我中心行IVF-ET治疗的46例子宫内膜异位症合并不孕患者的55个取卵周期作为内异症组（EMS组）；选择同期行IVF-ET治疗的126例非子宫内膜异位症患者的156个周期作为对照组(非EMS组)，平衡两组患者的一般情况后，从CA-125水平、窦卵泡数（AFC）、促排卵药物启动量/总量、HCG日内膜厚度/类型、HCG日大卵泡数（直径≥14mm卵泡）、HCG日雌二醇(estrogen，E2)、HCG日每大卵泡数E2、获卵数、受精方式、MII数、正常受精数/卵裂数、优胚数、正常受精率、卵裂率、优胚率、胚胎着床率、生化妊娠率、临床妊娠率、早期流产率、活产率、周期取消率等方面进行回顾性分析，了解EMS对EMS相关性不孕患者的实验室及临床结局的影响；再将两组临床资料按临床结局分别分为妊娠组、未妊娠组，进一步明确EMS组和非EMS组中与妊娠结局相关的因素。
　　2.2、实验研究：
　　1）选择6周龄雌性无特殊病原体（specific pathogen free，SPF）级KM（昆明）小鼠33只，随机分为三组，每组11只。
　　2）适应新环境1周后，手术取出小鼠左侧子宫角，均分为4段，剪开子宫腔，得到四块子宫组织。其中两块组织以内膜面朝向腹壁的方向分别缝合在切口两侧腹壁上，一块组织剪碎后注入小鼠腹腔，剩余一块组织送病理检查，以确认所取组织来源于小鼠子宫；三组小鼠均采用此方法建立子宫内膜异位症模型。
　　3）于手术后2周、3周、4周分别处死三组小鼠，观察内异灶形态，并进行如下统计计算：①比较各组小鼠的术后存活率、不同部位病灶形成率、异位灶囊泡形成率及模型成功率；②组内比较腹壁、网膜、肠壁三个部位组织碎片的种植成功率；③组内比较缝合、碎片种植、缝合+碎片种植三种建模方式的成功率；④比较三组小鼠异位病灶的平均体积。
　　3.结果
　　3.1、临床研究：
　　EMS组 CA-125水平、周期取消率高于对照组（P＜0.05）；基础窦卵泡数（AFC）、HCG日大卵泡数、获卵数、MII数、2PN数、卵裂数、优胚数、优胚率低于对照组（P＜0.05）；HCG日大卵泡数与EMS患者妊娠失败的相关回归系数小于0（P＜0.05）。
　　3.2、实验研究：
　　本实验采用 KM小鼠进行EMS的建模，参与本实验的33只小鼠中，术后存活28只。①三组小鼠术前未区分动情周期，但术后存活率、各部位病灶形成率、囊泡形成率及模型成功率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；②三组的组内腹壁、网膜、肠壁三个部位内膜碎片种植成功率的比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；③三组中组内缝合、碎片种植、缝合+碎片种植三种方式建模方式成功率的比较，其中仅术后4周组中碎片种植比缝合、缝合+碎片种植两种建模方式的成功率低，差异有统计学意义（P＜0.05），后两者方式的建模成功率均为100%；④三组小鼠异位病灶平均体积比较结果显示，术后2周小鼠异位病灶体积小于术后4周小鼠异位病灶体积（4.00±2.85mm3 Vs.25.64±15.93mm3，P=0.001），差异有显著性统计学意义。
　　4.结论
　　4.1、临床研究：
　　子宫内膜异位症合并不孕患者卵巢储备功能下降，胚胎质量下降，更容易取消周期。但其卵子成熟率、正常受精率、卵裂率及临床结局与非内异症不孕患者相比无明显差别；HCG日大卵泡数是EMS患者妊娠的保护因素。
　　4.2、实验研究：
　　1）术后2周EMS模型已成功，且造模前无需统一动情周期；
　　2）子宫组织碎片在腹壁、大网膜、肠壁的种植率无差异；
　　3）术后2-3周行下一步研究的，可采用子宫组织碎片腹腔种植法建模；术后4周行下一步研究的，可采用子宫片段腹壁缝合法建模；
　　4）造模术后4周，异位灶平均体积最大，EMS模型效果最佳。

目录

声明

英文缩略词表

引言

一、临床研究

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

二、实验研究

1 实验材料与方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献

附录

致谢

综述:子宫内膜异位症患者在位内膜异常改变的研究进展