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急性酒精性肝损伤小鼠模型中内参基因的选择
1.1 geNorm，BestKeeper 和 NormFinder工具用于评估急性酒精性肝损伤小鼠
1.2不同内参基因的选择对内质网应激相关基因表达水平的影响
急性酒精性肝损伤小鼠模型中内质网应激对外泌体miR-122表达的影响
2.1 4-苯基丁酸对内质网应激的影响
2.2内质网应激对外泌体miR-122表达的影响
Selection of reference genes in mouse models of ac
Evaluation of the stability of reference gene expr
Effects?of?different?reference?genes?on?relative?e
Effects of ERS on expression of miR-122 in mouse m
2.1 Effect of PBA on the endoplasmic reticulum str
2.2 Effect of endoplasmic reticulum stress on the
前言
实验材料
2.1实验动物
2.2药品与试剂
2.3仪器与设备
实验方法
3.1小鼠急性酒精性肝损伤模型的建立
3.2血清肝生化指标和肝脏组织病理学检测
3.3肝脏组织病理学检测
3.3.1小鼠肝组织HE染色
3.3.2小鼠肝组织TUNEL染色
3.4.1肝脏组织总蛋白提取
3.4.2 BCA法总蛋白定量
3.4.3实验用液的配制
3.4.4聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）
3.4.5转膜（湿转法）
3.4.6蛋白免疫印迹
3.5血清外泌体RNA提取
3.5.1准备样品
3.5.2分离外泌体
3.5.3透射电镜检测外泌体
3.5.4外泌体RNA提取
3.5.5 cDNA的合成
3.6荧光定量Real-time PCR（qRT-PCR）
3.6.1肝脏组织总RNA的提取
3.6.2 cDNA的合成
3.6.3引物序列
3.7数据处理
实验结果
4.1选择和验证急性酒精性肝损伤小鼠模型中的内参基因
4.1.1急性酒精性肝损伤模型的建立
4.1.1.1急性酒精性肝损伤模型小鼠的肝重和肝重系数变化
4.1.1.2小鼠急性酒精性肝损伤血清ALT活性的变化
4.1.1.3 酒精诱导小鼠急性肝损伤病理学变化
4.1.2 实时定量PCR数据分析
4.1.3评估内参基因表达的稳定性
4.1.3.1 geNorm的分析结果
4.1.3.2 NormFinder的分析结果
4.1.3.3 Bestkeeper的分析结果
4.1.4基于不同内参基因的选择内质网应激相关基因表达的所存在的差异性
4.2内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠血清中外泌体miR-122表达的影响
4.2.1 PBA对酒精诱导的小鼠急性肝损伤模型的影响
4.2.1.1 PBA对急性酒精性肝损伤小鼠的影响
4.2.1.2 PBA对酒精诱导的急性肝损伤血清中ALT活性所产生的影响
4.2.1.3 PBA对急性酒精性肝损伤小鼠肝脏病理的影响
4.2.2 PBA对急性酒精性肝损伤小鼠内质网应激的影响
4.2.2.1 PBA对急性酒精性肝损伤肝脏中GRP78表达水平所产生的影响
4.2.2.2 PBA对急性酒精性肝损伤肝脏中磷酸化eIF2α表达水平所产生的影响
4.2.2.3 PBA对急性酒精性肝损伤肝脏中磷酸化IRE1α表达水平所产生的影响
4.2.3 内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠血清中外泌体miR-122表达的影响
4.2.3.1 提取血清外泌体的鉴别
4.2.3.2 内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠肝脏中pri-miR-122表达的影响
4.2.3.3 内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠血清外泌体中pri-miR-122表达的影响
4.2.3.4 内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠肝脏中miR-122表达的影响
4.2.3.5 内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠血清外泌体中miR-122表达的影响
讨论
5.1急性酒精性肝损伤小鼠模型中内参基因的选择和验证
5.2内质网应激对急性酒精性肝损伤小鼠血清中外泌体miR-122表达的影响
结论
参考文献
附录
致谢
综述
