声明
符 号 说 明
1前言
1.1糖的主要生理功能
1.1.1糖与植物的生长发育
1.1.2糖与植物抗病菌能力
1.1.3糖与激素信号
1.2植物中的糖成分
1.2.1植物中各种糖组分
1.2.2单糖在植物中的作用
1.2.3单糖在生物技术中发挥作用
1.2.4果实中的单糖成分及作用
1.3糖的合成与转运
1.3.1糖的合成
1.3.2糖的转运
1.3.3糖转运蛋白
1.3.4 糖转运蛋白参与植物抗性
1.4本研究的目的与意义
2 材料和方法
2.1 材料
2.1.1 植物材料
2.1.2生理指标测定试剂及相关仪器
2.1.3感受态菌株
2.1.4载体和酶
2.1.5培养基
2.1.6 抗生素
2.1.7液相色谱测定糖、酸组分
2.2 实验方法
2.2.1平均单果重的测定
2.2.2果形指数
2.2.3 花青苷含量测定
2.2.4维生素C含量测定
2.2.5植物组织总RNA提取
2.2.6植物基因组DNA提取
2.2.7 cDNA 模板的合成
2.2.8 荧光定量PCR
2.2.9 基因克隆
2.2.10 克隆载体的构建
2.2.11 测序
2.2.12 质粒的提取和酶切反应
2.2.13 表达载体的构建
2.2.14 农杆菌的转化
2.2.15 单菌落阳性克隆的筛选
2.2.16 拟南芥材料的培养及遗传转化
2.2.17 苹果愈伤组织的遗传转化
2.2.18 表达分析材料的处理
2.2.19 拟南芥组织染色分析
2.2.21 过氧化氢（H2O2）含量测定
2.2.22 叶绿素含量的测定
2.2.23 可溶性糖的含量
2.2.24 数据处理
3结果与分析
3.1不同主栽品种苹果果实品质测定
3.1.1不同品种苹果基本特性
3.1.2不同主栽品种苹果可溶性糖组分
3.1.3不同主栽品种苹果有机酸组分
3.1.4不同品种苹果其他品质性状
3.1.5不同品种苹果糖含量与其他风味评价指标之间的相关性
3.2 果实发育中糖含量与糖转运蛋白基因表达
3.3 MdSTP1蛋白序列分析
3.4 MdSTP1的亚细胞定位
3.5 MdSTP1的时空表达特性
3.5.1组织化学法分析MdSTP1表达的组织特异性
3.5.2定量分析MdSTP1的时空表达特性
3.6 MdSTP1响应糖信号和胁迫因子
3.6.1定量分析MdSTP1响应糖信号
3.6.2 MdSTP1响应非生物胁迫
3.7 MdSTP1转基因材料获得
3.7.1 异位表达MdSTP1拟南芥鉴定
3.7.2 MdSTP1过量表达苹果愈伤组织鉴定
3.8 MdSTP1增加了转基因材料可溶性糖含量
3.8.1 异位表达MdSTP1拟南芥可溶性糖含量
3.8.2 MdSTP1过量表达愈伤组织可溶性糖含量增加
3.9异位表达MdSTP1拟南芥提高了的糖敏感性
3.9.1 异位表达MdSTP1拟南芥葡萄糖敏感性提高
3.9.2异位表达 MdSTP1拟南芥蔗糖敏感性提高
3.10 MdSTP1 降低了植物材料盐胁迫抗性
3.10.1 异位表达MdSTP1 拟南芥抗盐性降低
3.10.2 MdSTP1 过量表达愈伤组织对盐胁迫敏感
3.11 异位表达MdSTP1 提高了拟南芥ABA 敏感性
3.12 异位表达MdSTP1 拟南芥开花提前
4讨论
4.1 MdSTP1底物特异性与组织表达特性
4.2 MdSTP1与植物的逆境抗性
4.3 MdSTP1调控植物生长
5结论
参考文献
7附 录
致谢
9攻读学位期间发表论文情况
山东农业大学;
