真核表达的鸡CCCH型锌指抗病毒蛋白抗四种病毒感染研究

目录

声明

符号说明

1前 言

1.1锌指蛋白简介

1.1.1 锌指蛋白的结构

1.1.2 锌指蛋白的生物学活性

1.1.3 CCCH型锌指抗病毒蛋白的发现

1.1.4 CCCH型锌指抗病毒蛋白的作用机制

1.1.5 CCCH型锌指抗病毒蛋白的研究展望

1.2 昆虫表达系统简介

1.3 NDV、MDV、REV、IBDV 简介

1.3.1 NDV 简介

1.3.2 MDV 简介

1.3.3 REV 简介

1.3.4 IBDV 简介

1.4 研究目的与意义

2 材料与方法

2.1实验材料

2.1.1 病毒、真核表达载体、菌株、细胞

2.1.2试验试剂

2.1.3主要试剂的配制

2.1.4 主要试验仪器

2.2 试验方法

2.2.1 chZAP目的基因的获取

2.2.3 构建重组质粒 pBacPAK8-chZAP

2.2.4 真核表达 chZAP

2.2.5 pBacPAK8-chZAP蛋白的检测与纯化

2.2.6 chZAP 体外对 NDV、MDV、REV、IBDV 的抗病毒效果

3 结果与分析

3.1 chZAP目的基因的获取

3.1.1 设计引物提取目的基因

3.2 重组杆状病毒质粒的获取

3.3 真核表达 chZAP

3.3.1 P1代杆状病毒的制备

3.3.2 P2 代杆状病毒的制备

3.3.3 P3 代杆状病毒的鉴定

3.3.4 P3 代杆状病毒的滴定

3.3.5 真核表达chZAP 的 western blot 检测

3.4 chZAP的纯化及鉴定

3.5 chZAP 体外抗病毒试验

3.5.1 qPCR 检测 chZAP 对 NDV、MDV、IBDV、REV 的体外抗病毒效果

3.5.2 Western blot 检测 chZAP 对 NDV、MDV、IBDV、REV 的体外抗病毒效果

4 讨论

5 结论

参 考 文 献

致谢

攻读学位期间发表论文情况