引言
第一章 实验材料和试剂
1.1.1实验动物
1.1.2 实验试剂
1.1.3 实验抗体
1.2 实验细胞
1.3 主要实验试剂配置方法
(1) PBS溶液配制
(2) TAE储存溶液的配制
(3) 电泳缓冲液配制
(5) TBST洗脱液配制
(6) 封闭液配制
1.4 引物序列及反应条件
1.5 主要实验仪器和设备
第二章 实验方法
2.1细胞培养
2.1.1细胞复苏
2.1.2细胞传代
2.1.3细胞冻存
2.2实验药物配置及分组
2.2.1实验药物配置方法及分组
2.2.2流式细胞仪检测不同浓度中药单体对RAW264.7和DC2.4细胞系的免疫激活作用
2.3 逆转录PCR实验（RT-PCR）
2.4 PCR扩增目的基因
2.5 琼脂糖凝胶电泳
2.6 蛋白质印记实验（WB）
2.7 小鼠免疫分组及免疫流程
2.7.1灭活的B16F10黑色素瘤抗原制备
2.7.2免疫分组及免疫流程
2.8荷瘤小鼠模型建立
2.9分离小鼠脾脏淋巴细胞
2.10体外细胞杀伤实验
2.11体内回输实验
2.12流式细胞仪检测细胞因子的表达
2.12.1 体内抗原递呈细胞激活检测
2.12.2 CD4+T细胞，CD8+T细胞激活分泌的相关细胞因子检测
2.13 统计学分析
第三章 实验结果
3.1 不同中药单体对抗原递呈细胞的免疫激活作用
3.1.1 橙皮素作为疫苗佐剂在体外对RAW264.7细胞系和DC2.4细胞系的影响
3.1.2 灯盏花乙素作为疫苗佐剂在体外对RAW264.7细胞系和DC2.4细胞系的影响
3.1.3 虎杖苷作为疫苗佐剂在体外对RAW264.7细胞系和DC2.4细胞系的影响
3.1.4 地榆皂苷Ⅱ作为疫苗佐剂在体外对RAW264.7细胞系和DC2.4细胞系的影响
3.1.5 橙皮素和灯盏花乙素是两种有潜在使用价值的肿瘤疫苗佐剂
3.1.6 橙皮素具有良好的安全性
3.2 橙皮素激活APC中的信号通路
3.3 橙皮素作为佐剂在体外和体内激活抗原递呈细胞
3.4 橙皮素作为佐剂增强T淋巴细胞免疫反应
3.5 橙皮素作为佐剂降低调节性T淋巴细胞免疫反应
3.6 橙皮素作为佐剂抑制荷瘤小鼠模型中B16F10黑色素瘤的生长
3.7 橙皮素作为佐剂通过激活CD8+T细胞活性提高荷瘤小鼠的存活率
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
综述:黑色素肿瘤治疗的研究进展
参考文献
攻读学位期间研究成果
缩略词表
致谢
声明
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