分子佐剂C3d3与hCGβ基因融合增强hCGβ基因疫苗体液免疫应答

摘要

目的:提高hCGβ在真核细胞中的表达效率,观察分子佐剂C3d3增强hCGβ基因疫苗的体液免疫应答.方法:构建带有增强目的基因表达效率的狗胰岛素前原信号肽(DPPISS)的高效真核表达质粒pCMV4-hCGβ-C3d3、pCMV4-hCGβ和pCMV4-C3d3.分别用pCMV4-DPPISS-hCGβ-C3d3、pCMV4-DPPISS-hCGβ和pCMV4-DPPISS-hCGβ联合pCMV4-DPPISS-C3d3免疫BALB/c小鼠,各组免疫剂量分别为5、10、50、100、500 pmol,间隔3周相同剂量加强免疫1次.间接ELISA法分析免疫小鼠外周血抗hCGβ抗体动态变化以及IgG亚型.结果:含有DPPISS的pCMV4-hCGβ-C3d3较无DPPISS的pCMV4-hCGβ-C3d3在COS-7细胞中的表达效率明显提高.50 pmol是BALB/c小鼠hCGβ基因免疫的最佳免疫剂量.C3d3使得BALB/c小鼠hCGβ的免疫原性增强了400倍.hCGβ-C3d3免疫组IgG1/IgG2a比值明显高于hCGβ免疫组和hCGβ与C3d3联合免疫组.结论:分子佐剂C3d3与hCGβ基因融合能够显著增强hCGβ基因避孕疫苗的体液免疫应答及抗体类型转换.