目的:通过体内外实验，探讨一种新型的吉西他滨脂质纳米颗粒（GemC18-NPs）对（Lewis Lung Carcinoma,LLC）细胞的细胞毒性作用、诱导肿瘤细胞的凋亡情况以及在体内对LLC小鼠肺癌皮下移植瘤模型的肿瘤抑制作用。 方法: （1）MTT法检测不同浓度硬脂酰吉西他滨（GemC18）组、盐酸吉西他滨（GemHCl）组、吉西他滨脂质纳米颗粒（GemC18-NPs）组、空白纳米颗粒（NPs）组对细胞的体外细胞毒性作用及增殖抑制作用。 （2）采用流式细胞仪通过Annexin-V/PI双染实验检测GemC18-NPs对LLC细胞凋亡率的影响。 （3）建立LLC、C57BL/6J小鼠肺癌皮下移植瘤模型，待肿瘤直径长到3-4mm时，将荷瘤小鼠随机分为5组（每组8只）：（GemC18）组、（GemHCl）组、（GemC18-NPs）组、（NPs）组和5%甘露醇（Control）组，各组均采用灌胃法进行治疗，1次/2天，每2天测量一次小鼠体重及肿瘤长、短径大小，绘制小鼠体重及肿瘤体积变化曲线，治疗3周后脱颈处死小鼠，小心剥离瘤体，收集肿瘤组织，称瘤重并计算抑瘤率。4%多聚甲醛固定后进行H&E染色，光镜下观察肿瘤组织的病理形态学变化，用免疫组织化学法检测各组Ki67、caspase3、CD31蛋白的表达，CD31标记瘤组织血管内皮细胞，计数微血管密度（MVD），进一步以 TUNEL法检测GemC18-NPs诱导肿瘤细胞的凋亡率。 结果: （1）体外实验结果提示：①GemC18-NPs对LLC细胞有毒性作用，并且呈时间和浓度依赖性，GemHCl的IC50值明显低于GemC18-NPs（图2A）。②当GemHCl作用于LLC细胞24h时，其死亡率与GemC18-NPs作用于LLC细胞40h左右时的水平基本一致（图2B），表明GemC18-NPs具有缓释性。③空白纳米颗粒NPs对细胞生长影响较小（图3D）。④流式细胞术结果表明GemHCl组细胞凋亡率明显高于其他组。 （2）体内LLC、C57BL/6J皮下移植瘤抑制实验提示：①GemHCl组、GemC18组、GemC18-NPs组对LLC荷瘤小鼠瘤体生长均有抑制作用，从体积抑瘤率和瘤重抑瘤率两个方面来看GemC18-NPs组体积抑瘤率和瘤重抑瘤率明显超过GemHCl组体积抑瘤率（76.4% vs 49.74%）和GemC18组（76.4% vs 43.14%），GemHCl组瘤重抑瘤率（82.6% vs 53.7%）和GemC18组（82.6% vs 48.4%），统计学有显著性差异（P<0.05）；②TUNEL法检测结果提示GemC18-NPs组细胞凋亡指数平均值要显著高于GemHCl组（41.42±13.03 vs 22.76±1.36）、GemC18组（41.42±13.03 vs 17.12±6.21）（P<0.05）；③免疫组织化学法结果提示GemC18-NPs组Ki67的平均光密度、CD31的MVD平均值低于其他组（P＜0.05），GemC18-NPs组Caspase3蛋白的平均光密度的平均值要明显高于其他组，但没有统计学意义（P>0.05）。 结论:体外实验结果表明GemC18-NPs的细胞毒性要比GemHCl小，但作用时间具有延缓性，说明在体外GemC18-NPs同样具有细胞毒性作用，但可降低GemHCl的细胞毒性作用，GemC18-NPs在体外诱导细胞的凋亡率要明显小于 GemHCl（ P<0.05），在体内GemC18-NPs组具有比其他组具有更强的抑制肿瘤生长作用，可通过下调CD31、Ki67蛋白的表达并上调Caspase3蛋白的表达来增强抑制肿瘤细胞增殖与抗血管生成并提高肿瘤细胞的凋亡指数,其作用机制还需要进一步探讨。
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