微米级荧光杂交探针的制备及其在MicroRNA检测中的应用研究

目录

声明

1 绪论

1.1 荧光原位杂交技术的概述

1.1.1 荧光原位杂交技术的工作原理

1.1.2 荧光原位杂交技术的发展

1.2 基于信号放大的荧光原位杂交技术

1.2.1 聚合酶链式反应-荧光原位杂交（PCR-FISH）

1.2.2 滚环扩增反应-荧光原位杂交（RCA-FISH）

1.2.3 杂交链式反应-荧光原位杂交（HCR-FISH）

1.3 信号放大型荧光探针在环境分析中的应用

1.3.1 抗生素抗性基因的检测

1.3.2 致病菌的检测

1.3.3 细胞表面糖基化的检测

1.4 本论文的研究内容及意义

2 微米级荧光杂交探针的制备

2.1 材料与方法

2.1.1 实验材料

2.1.2 实验方法

2.2 结果与讨论

2.2.1 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验表征环状模板的合成

2.2.2 琼脂糖凝胶电泳实验验证RCA产物和SDA产物的合成

2.2.3 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验验证SDA产物的合成

2.2.4 无机焦磷酸酶对SDA产物的影响

2.2.5 SDA产物的纯化

2.2.6 激光共聚焦显微镜成像验证μSDat探针的合成

2.3 本章小结

3 微米级杂交探针的特性研究

3.1 材料与方法

3.1.1 实验材料

3.1.2 实验方法

3.2 结果与讨论

3.2.1 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳实验对纯化后sDP2进行定量

3.2.2 μSDat探针杂交性能的验证

3.3 本章小结

4 微米级荧光杂交探针在microRNA检测中的应用研究

4.1 材料与方法

4.1.1 实验材料

4.1.2 实验方法

4.2 结果与讨论

4.2.1 纸芯片器件工作原理

4.2.2 普鲁兰糖对表面杂交动力学的影响

4.2.3 灵敏度分析

4.2.4 选择性分析

4.2.5 多种细胞系中miR21的定量

4.3 本章小结

结论

参考文献

致谢