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摘要
第一章绪论
1 引言
2金黄色葡萄球菌肠毒素
2.1金黄色葡萄球菌肠毒素的特性及分类
2.2由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食源性疾病
3金黄色葡萄球菌肠毒素的检测方法
3.1动物学实验
3.2血清学试验
3.3分子生物学方法
3.4质谱分析法
3.5免疫分析法
4量子点
4.1量子点的光学性质
4.2量子点的应用研究进展
5研究目的、意义及主要研究内容
第二章金黄色葡萄球菌A型肠毒素单克隆抗体的制备
1 实验材料
1.1实验动物
1.2主要试剂
1.3主要溶液配制
1.4主要仪器
2实验方法
2.1 Balb/c小鼠免疫
2.2间接ELISA法测血清抗体效价
2.3制备饲养细胞
2.5杂交瘤细胞的制备及筛选
2.6阳性杂交瘤细胞的亚克隆,筛选及扩大培养
2.7细胞冻存和复苏
2.8体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体
2.9鉴定单克隆抗体的亚类
2.11 单克隆抗体效价的测定
2.12免疫印迹及间接竞争ELISA检测单克隆抗体特异性
3结果分析
3.1小鼠抗血清效价检测
3.2杂交瘤细胞筛选
3.3单克隆抗体亚类的鉴定
3.4最佳包被抗原浓度和二抗稀释度的确定
3.5单克隆抗体效价测定结果
3.6间接竞争ELISA检测单抗特异性
3.7免疫印迹试验检测单抗特异性
4讨论
4.1超抗原肠毒素单克隆抗体制备的特殊性
4.2动物免疫
5本章小结
第三章SEA检测试剂盒的制备
1.3主要溶液配制
1.4主要仪器
2试剂盒制备方法
2.1各组分的制备
2.2组贴大卡制备试剂卡
2.3 SEA标准品溶液的制备
2.4量子点免疫层析试纸条结果的判定
2.5试剂工艺原材料优化
3结果分析
3.1 C线包被抗体浓度的优化
3.2 T线抗体包被浓度和标记物稀释比例的棋盘滴定
3.3 NC膜的优化
3.4包被缓冲液配方的优化
3.5标记物稀释液配方的优化
3.6样品垫处理液配方的优化
4本章小结
第四章试剂盒性能评估及其在食品检测中的应用
1 材料
1.1主要材料
1.2主要试剂
1.3主要仪器
2试剂盒性能评估
2.1 SEA标准品溶液的制备
2.6试剂盒线性范围评价
2.7试剂盒精密度评价
2.8试剂盒稳定性评价
3试剂盒在食品检测中的应用
3.1液态乳制品中SEA的添加与回收
3.2生猪肉中SEA的检测
4结果分析
4.1试剂盒灵敏度评价
4.2试剂盒特异性评价
4.3试剂盒线性范围评价
4.4试剂盒精密度评价
4.5试剂盒稳定性评价
4.6液态乳制品中SEA的回收率
4.7生猪肉中SEA的检测结果
5本章小结
全文总结
参考文献
论文创新点
附录中英文对照表
致谢
南京农业大学;