声明
摘要
缩略词表
第一章文献综述
1 植物分蘖及分枝的调控机制
1．1 LS／LAS／MOC1途径
1．2独脚金内酯途径
1．3 SPL类转录因子调控途径
1．4植物激素对分蘖及分枝的调控
1．5环境因素对分蘖及分枝的调控
2 SHI家族蛋白研究进展
3本研究的目的意义
第二章shi1突变体表型鉴定
1材料与方法
1．1植物材料及生长条件
1．2农艺性状调查
1．3石蜡切片观察
1．4 EdU荧光染色观察
2结果与分析
2．1 shi1突变体的分蘖数显著降低
2．2 shi1突变体分蘖芽后期生长发育受阻
2．3 shi1突变体的穗分枝显著增加
2．4 shi1突变体其他表型变异
3讨论
第三章OsSHl1基因的图位克隆及转基因验证
1材料与方法
1．1水稻叶片DNA提取
1．2分子标记检测
1．3分子标记筛选、开发及基因精细定位
1．4 DNA片段扩增、回收、载体连接及测序
1．5 RNA提取、反转录及RT-PCR
1．6抗体制备、蛋白提取及抗体特异性检测
1．7 Western blot分析
1．8转基因互补及敲除载体构建
1．9农杆菌冻融转化及遗传转化
1．10阳性转基因植株的检测
2结果与分析
2．2 OsSHl1基因的精细定位及克隆
2．3 OsSHl1基因的转基因互补及敲除验证
3讨论
第四章OsSHI1蛋白的功能分析
1材料与方法
1．1亚细胞定位载体构建及质粒大量提取
1．2原生质体制备及亚细胞定位
1．3转录激活活性检测
1．4酵母双杂交筛选互作蛋白
1．5烟草叶片细胞双分子荧光互补(BiFC)
1．6原核表达与蛋白纯化
1．7 Pull-down分析
1．8酵母单杂交
1．9染色质免疫共沉淀(ChIP)
1．10凝胶阻滞分析(EMSA)
1．11荧光素酶活性检测(LUC)
1．12过表达载体构建
1．13干扰载体构建
2结果与分析
2．1 OsSHl1编码拟南芥SHI家族同源蛋白
2．2 OsSHI1亚细胞定位、转录激活活性及组织表达模式分析
2．3 OsSHl1与IPA1互作
2．4 OsSHI1直接结合OsTB1及OsDEP1的启动子
2．5 OsSHl1抑制IPA1对下游基因的转录激活活性
2．6 OsSHI1与IPA1相互拮抗调控水稻株型发育
3 讨论
第五章水稻籽粒发育调控基因剧巩的克隆与功能分析
1材料与方法
1．1实验材料及种植条件
1．2扫描电镜观察
1．3可溶性糖含量检测
1．4精细定位及图位克隆
1．5 RNA提取、反转录及荧光定量分析
1．6亚细胞定位
1．7组织GUS染色
1．8 PFP酶活检测
2结果与分析
2．1砌突变体表型观察
2．2精细定位与图位克隆
2．3 PFPβ的亚细胞定位及组织表达模式
2．4 PFPβ参与种子碳代谢过程
3讨论
全文结论
创新点
参考文献
附录
攻读学位期间发表论文
致谢
南京农业大学;
