论文说明
声明
摘要
缩略语中英文对照(Abbreviation)
第一章脂肪组织的发育和调控
1脂肪组织发育
2细胞成脂分化过程
2．1细胞生长周期停滞和定向成脂分化
2．2激素诱导
2．3细胞融合后的有丝分裂和克隆性扩增
2．4生长停滞的GD期
2．5终末分化的晚期事件
3脂肪细胞分化的转录调控
3．1 C／EBPs对脂肪细胞分化的调控
3．2 PPARγ对脂肪细胞分化的调控
4脂肪细胞分化的激素／旁分泌信号调控
4．1脂肪组织的旁分泌效应
4．2内分泌激素效应
4．3骨骼肌的旁分泌效应
第二章肌内脂肪发育的研究进展
1肌内脂肪发育概述
2肌内脂肪沉积的影响因素
2．1肌内脂肪沉积相关的基因表达
2．2遗传变异／数量基因座(QTL)和表观遗传
3体外脂肪细胞研究模型
4成熟脂肪细胞去分化
第三章胰岛素信号通路与脂质代谢调控
1胰岛素信号级概述
2胰岛素受体的基因结构
3胰岛素信号通路调控机体葡萄糖和脂质代谢
3．1调节糖原合成
3．2调节糖异生
3．3调节脂质合成和降解
4脂肪组织中胰岛素信号通路的活性
第四章肌内与皮下脂肪细胞的胰岛素信号差异分析
1实验方法
1．1实验动物和样品采集
1．2猪肌内和皮下前体脂肪细胞的分离和培养
1．3猪肌内和皮下前体脂肪细胞的验证
1．4细胞mRNA的提取
1．5前体脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞
1．6 siRNA转染
1．7油红O染色
1．8甘油三酯测定
1．9 RT-qPCR
1．10线粒体DNA含量分析
1．11数据统计
2实验结果
2．1猪肌内和皮下前体脂肪细胞的分离和验证
2．2胰岛素对猪脂肪细胞分化的诱导作用
2．3 抑制前体脂肪细胞中INSR／IGF-1R表达降低细胞分化水平
2．4肌内与皮下脂肪细胞中INSR和IGF-1R的表达水平
2．5肌内与皮下前体脂肪细胞分化水平差异
2．6肌内与皮下脂肪细胞脂质合成过程中底物的利用
2．7肌内与皮下脂肪细胞中的脂肪酸氧化
3讨论
第五章肌肉条件培养基对肌内脂肪细胞胰岛素信号和成脂分化影响的分析
1实验方法
1．1肌肉条件培养基的采集
1．2细胞活力测定
1．3细胞凋亡
1．4前体脂肪细胞的成脂分化
1．5油红O染色
1．6甘油三酯测定
1．7 mRNA的提取和RT-PCR
1．8蛋白定量分析
1．9脂解测定
1．10线粒体DNA含量分析
1．11统计分析
2结果
2．1肌肉条件培养基(MCM)的鉴定以及MCM对皮下前体脂肪细胞增殖的影响
2．2 MCM诱导猪前体脂肪细胞的凋亡
2．3 MCM对脂肪分化的影响
2．4 MCM提高细胞中INSR／IGF-1R的表达并激活胰岛素信号通路
2．5 MCM对分化中脂肪细胞的胰岛素信号的调控
2．6 MCM抑制脂肪细胞分化主要在初期到中期分化阶段起作用
2．7 MCM提高脂肪细胞脂解和脂肪酸氧化
3讨论
第六章肌肉条件培养基通过NCOA3对肌内脂肪细胞成脂分化调控的分析
1实验材料和方法
1．1实验动物和组织样品的采集
1．2肌内脂肪组织(IMAT)的分离
1．3组织／细胞mRNA的提取
1．4 qRT-PCR和PCR
1．5荧光素酶活性测定实验
1．6 miRNA mimics和载体共转染到猪肾15细胞(PK15)
1．7荧光活性的验证
1．8肌肉条件培养基的采集
1．9 miRNA的过表达和抑制
1．10 miRNAs靶基因预测的数据库和网址
2．2肌内脂肪和皮下脂肪组织中miR-17-5p的差异表达
2．3 pmirGLO-NCOA3-3’UTR-WT与pmirGLO-NCOA3-3’UTR-mut的构建
2．4 miR-17-5p靶向调控NCOA3表达的验证
2．5肌肉条件培养基(MCM)调控miR-17-5p的表达
2．6 miR-17-5p 抑制肌内前体脂肪细胞的分化
3讨论
第七章肌肉分泌因子FGF21对脂肪细胞胰岛素信号和脂质合成的影响
1实验材料与方法
1．1 FGF21浓度的测定
1．2皮下前体脂肪细胞培养
1．3前体脂肪细胞成脂诱导
1．4脂肪细胞油红O染色
1．5细胞内甘油三酯测定
1．6脂解测定
1．7 mRNA提取和RT-PCR
2结果
2．1肌肉分泌因子FGF21的差异表达
2．2 FGF21抑制脂肪细胞脂质合成
2．3 FGF21提高了脂肪细胞的胰岛素敏感性
2．4 FGF21对脂肪细胞的脂解效应
2．5 FGF21对脂肪细胞脂棕色化效应
3讨论
参考文献
附录
全文结论
创新点
致谢
攻读博士学位期间发表的论文
南京农业大学;
