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第一章文献综述
1酒精及其代谢研究进展
1.1酒精体内代谢研究进展
1.2酒精性肝损伤保护研究
2乙醇脱氢酶及乙醛脱氢酶研究进展
2.1定义与分类
2.2酵母来源ADH及ALDH
2.3ADH及ALDH应用研究
3乳酸菌表达研究进展
3.1乳酸菌及其表达系统研究
3.2 NICE高效诱导表达系统研究进展
3.3乳酸菌食品级筛选标记研究
4研究目的、意义与内容
参考文献
第二章乙醛脱氢酶在乳酸菌中克隆表达及全细胞催化乙醛降解研究
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.2重组NZ3900/pNZ8148-istALDH生长曲线测定
2.3 istALDH基因在乳酸乳球菌NZ3900中的诱导表达
2.4重组乙醛脱氢酶诱导条件研究
2.5 pH值和温度对IstALDH活性乳酸菌酶活力的影响
2.6全细胞转化催化乙醛降解研究
3讨论
4本章小结
参考文献
第三章乙醇脱氢酶在乳酸菌中表达及分离纯化
1.1材料
1.2方法
2.1酿酒酵母BY4341基因组提取及scADH基因克隆
2.2表达载体pNZ8148-scADH的构建
2.3 scADH在乳酸乳球菌的诱导表达
2.4重组乙醇脱氢酶纯化
2.5重组ScADH最适反应温度与稳定性
2.6重组ScADH最适反应pH与稳定性
3讨论
4本章小结
参考文献
第四章乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶在乳酸菌中共表达
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1双启动子共表达载体pNZ8148-GBD构建
2.2双顺反子共表达载体pNZ8148-GRBS构建
2.3融合共表达载体pNZ8148-RHA/B/C构建
2.4 ScADH和IstALDH共表达验证
2.7菌体浓度对活性乳酸菌冻干的影响
2.8预冻温度对重组乳酸菌冻干的影响
3讨论
4本章小结
参考文献
第五章活性乳酸菌冻干粉对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用研究
1.1材料
1.2方法
2结果与分析
2.1 ICR小鼠体重变化、肝脏指数及一般状态观察
2.2小鼠血清ALT、AST及AKP活力比较
2.3小鼠血清血脂指标比较
2.4小鼠肝组织抗氧化指标比较
2.5肝组织病理学观察
2.6肝组织Cyp2e1,Mcp1及Tlr系列基因表达分析
3讨论
4本章小结
参考文献
第六章基于surfactin抗性筛选的乙醛脱氢酶乳酸菌表达载体构建
1.1材料
1.2方法
2.1 NZ3900/swrC构建及swrC基因表达验证
2.2 NZ3900/swC生长曲线测定
2.3 swrC基因增强NZ3900对surfactin免疫作用研究
2.4 surfactin筛选浓度研究
2.5 swrC基因在LP163中作为筛选标记研究
2.6双筛选标记乙醛脱氢酶表达载体构建
2.7 Surfactin筛选质粒传代稳定性
3讨论
4本章小结
参考文献
全文结论
论文创新点
展望
攻读博士期间发表论文及专利情况
附图
致谢
南京农业大学;