鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留检测方法的研究

摘要

地克珠利和妥曲珠利属于三嗪类抗球虫药，具有高效抗球虫能力，广泛应用于畜牧业中，尤其防治鸡球虫病。为保障消费者安全，控制地克珠利和妥曲珠利在动物性食品中的残留迫切需要建立灵敏、高效的三嗪类药物残留检测技术。基于此，本文开展了以下研究工作：1．采用正交设计，研究基质固相分散萃取(MSPDE)的制约因素，建立鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的基质固相分散萃取方法；2．利用现代仪器分析技术，研究地克珠利和妥曲珠利的同时分离检测方法，结合基质固相分散萃取技术建立可用于鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留同时检测的基质固相分散．高效液相色谱紫外检测 (MSPD-HPLC/UV) 法和基质固相分散．高效毛细管电泳二极管阵列检测(MSPD-HPCE/PDA)法。具体结果如下： 1．鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留的MSPD方法的建立采用正交实验设计，研究了四种参数对MSPD法回收肉鸡组织中添加的三嗪类药物效率的影响。结果表明，固相填料用量、洗脱剂种类和用量三种因素对回收率的影响较大。在正交实验结果的基础上，首次建立了鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留基质固相分散萃取方法：层析柱自下而上依次装入玻璃棉、1.5g无水Na<,2>SO<,4>、样品混合物(2gC18+05g组织，研匀，晾干)、0.5g无水Na<,2>SO<,4>，压紧。依次用8mL 正己烷和8mL甲醇水溶液(1:4)淋洗，然后用8mL 甲醇洗脱。收集的洗脱液50℃旋转蒸干后，用0.5mL，流动相溶解，过0.22μm滤膜。建立的MSPD法的时间和溶剂消耗均明显少于其他几种方法。与最常用的乙腈萃取-SPE净化方法相比，节约时间70％以上，节约溶剂也达70％左右。 2．鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留MSPD-HPLC/UV同时检测方法的建立建立了地克珠利和妥曲珠利在肉鸡组织中残留检测的基质固相分散萃取。高效液相色谱紫外检测法(MSPD-HPLC/UV)。色谱条件为：分析柱，C<,18>，5μm，250mm×4.6mmi．d．；流动相，0.05mol/L磷酸/三乙胺(pH3.0) -乙腈(40+60)，流速1.0mL·min<'-1>；紫外波长240nm；进样体积20μL；柱温20℃。在优化的色谱分离条件下，地克珠利和妥曲珠利获得了良好的分离，两种药物的保留时间分别为8.92和11.04min。在50～1000ng·mL<'-1>线性范围浓度内，组织样品中地克珠利和妥曲珠利的回收率分别为71.41～84.06％(CV3.76～11.26％)和71.13～81.90％(CV5.22～12.11％)；检测限分别为8～10ng·g<'-1>和7～10ng·g<'-1>，定量限均小于15ng·g<'-1>。 3．鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留MSPD-HPCE/PDA同时检测方法的建立采用高效毛细管电泳．二极管阵列检测法建立了地克珠利和妥曲珠利两种结构相近的三嗪类抗球虫药物的分离检测方法。实验通过对电泳缓冲液类型、离子浓度和pH值、分离电压、分离温度等电泳条件进行探索，建立能同时检测地克珠利和妥曲珠利的高效毛细管电泳法：未涂层石英毛细管柱(75μm×50cm)，采用0.5 psi压力进样6s，分离电压为22kV，柱温为20℃，紫外检测波长210nm；运行缓冲液为30mmol/L硼砂缓冲液(NaOH调至pH9.5)。上述2种药物在8min内实现了基线分离。鸡组织样品经基质固相分散萃取法处理后进行高效毛细管电泳检测，在100～5000ng·mL<'-1>线性范围内，在肌肉、肝脏和肾脏三种组织样品中地克珠利和妥曲珠利的回收率分别为74.3～87.4％(CV7.50～11.98％)和71.7～83.0％(CV7.97～13.13％)，地克珠利和妥曲珠利的检测限为0.01～0.05μg·g<'-1>(S/N=3)。实验结果表明，本文报道的两种用于鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留同时检测法——基质固相分散．高效液相色谱紫外检测(MSPD-HPLC/UV)法和基质固相分散-高效毛细管电泳二极管阵列检测(MSPD-HPCE/PDA)法，灵敏度高、精密度好，达到了地克珠利和妥曲珠利残留分析的要求。方法的建立将为地克珠利和妥曲珠利的残留检测提供新方法，并对监控二者在动物源性食品的残留，保障和维护人们的健康，具有重要的理论和实践意义。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文对照表

文献综述

1引言

2材料与方法

2.1实验材料

2.2溶液配制

2.3三嗪类抗球虫药色谱分离条件

2.4三嗪类抗球虫药残留基质固相分散萃取方法的建立

2.5三嗪类药物残留组织样品不同前处理方法的比较

2.6结果计算

3结果与分析

3.1三嗪类抗球虫药色谱分离条件的优化

3.2三嗪类抗球虫药残留组织样品前处理方法的建立

3.3三嗪类抗球虫药残留检测方法的建立

3.4三嗪类抗球虫药残留组织样品的检测

4讨论

4.1三嗪类抗球虫药的HPLC分离检测

4.2三嗪类抗球虫药的毛细管电泳分离

4.3三嗪类抗球虫药残留的组织样品前处理技术

4.4三嗪类抗球虫药残留的同步检测方法

5结论

参考文献

附录

致谢

附作者在读期间发表的学术论文

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