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HIF--1α通路激活在红景天苷拮抗甲基汞致星形胶质细胞毒性中的作用及其机制研究

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第一章 绪论

1.1 甲基汞

1.1.1 甲基汞的毒性概况

1.1.2 甲基汞的神经毒性及其毒性机制

1.1.3 甲基汞中毒的治疗现状和局限性

1.2 红景天苷

1.2.1 红景天及红景天苷概述

1.2.2 红景天苷的药理活性

1.3 HIF-1α信号通路

1.4 研究目的与意义

1.5 研究内容

1.6实验设计方案

第二章 原代星形胶质细胞的培养与鉴定

2.1 实验材料

2.1.1实验细胞

2.1.2实验仪器及设备

2.1.3实验药品及试剂

2.1.4试剂配制

2.2实验方法

2.2.1原代SD大鼠星形胶质细胞的提取、分离和培养

2.2.2原代星形胶质细胞的鉴定

2.3实验结果

2.4本章小结

第三章 MeHg在星形胶质细胞和SD大鼠中的毒性特征

3.1实验材料

3.1.1实验细胞

3.1.2实验动物

3.1.3实验仪器及设备

3.1.4实验药品及试剂

3.1.5实验室常用试剂配制

3.2实验方法

3.2.1细胞培养和传代

3.2.2 MTT法检测细胞增殖活力

3.2.3 LDH法检测细胞毒性

3.2.4 Hoechst33342染色法检测细胞凋亡

3.2.5 Western blot方法检测蛋白表达

3.2.6 SD大鼠MeHg染毒模型

3.2.7数据统计分析

3.3实验结果

3.3.1 MeHg对星形胶质细胞增殖活力的影响

3.3.2 MeHg对星形胶质细胞LDH漏出率的影响

3.3.3 Hoechst33342染色检测MeHg对星形胶质细胞凋亡的影响

3.3.4运用Western blot方法检测MeHg对星形胶质细胞HIF-1α信号通路蛋白表达的影响

3.3.5运用Western blot方法检测急性MeHg暴露对SD大鼠脑组织HIF-1α信号通路蛋白表达的影响

3.4讨论

3.5本章小结

第四章 红景天苷预处理对MeHg致星形胶质细胞损伤的保护作用

4.1实验材料与方法

4.1.1实验材料

4.1.2细胞培养与传代

4.1.3 MTT法检测不同处理对细胞增殖活力的影响

4.1.4 LDH法检测不同处理对细胞毒性的影响

4.1.5 Hoechst33342染色法观察不同处理因素对细胞凋亡的影响

4.1.6数据统计分析

4.2实验结果

4.2.1红景天苷预处理对星形胶质细胞增殖活力的影响

4.2.2红景天苷预处理对星形胶质细胞LDH漏出率的影响

4.2.3红景天苷预处理对MeHg染毒星形胶质细胞凋亡的影响

4.3讨论

4.4本章小结

第五章 HIF-1α信号通路在红景天苷拮抗MeHg致星形胶质细胞损伤中的作用研究

5.1实验材料与方法

5.1.1实验材料

5.1.2细胞培养与传代

5.1.3 MTT法检测不同处理对细胞增殖活力的影响

5.1.4 Western blot法检测不同处理对蛋白表达的影响

5.1.5 siRNA转染

5.1.6数据统计分析

5.2实验结果

5.2.1红景天苷对MeHg染毒细胞HIF-1α信号通路蛋白表达的影响

5.2.2 敲减HIF-1α对红景天苷拮抗MeHg毒性的影响

5.3讨论

5.4本章小结

第六章 红景天苷激活HIF-1α信号通路的作用机制的初步研究

6.1材料与方法

6.1.1实验仪器与设备

6.1.2实验药品与试剂

6.1.3细胞培养与传代

6.1.4 Trizol法抽提细胞RNA

6.1.5 RNA浓度测定

6.1.6逆转录反应

6.1.7 RT-PCR

6.1.8 MTT法检测不同处理对细胞增殖活力的影响

6.1.9Western blot法检测不同处理对蛋白表达的影响

6.1.10数据统计分析

6.2实验结果

6.2.1红景天苷干预对HIF-1αmRNA水平的影响

6.2.2 HIF-1α核转位抑制剂2MeOE2对红景天苷拮抗MeHg毒性的影响

6.2.3红景天苷对PHD-2依赖的HIF-1α降解途径的影响

6.3讨论

6.4本章小结

第七章 紫外可见光谱分析红景天苷与甲基汞结合的作用研究

7.1材料与方法

7.1.2实验药品与试剂

7.1.2实验仪器及设备

7.2实验方法

7.2.1 红景天苷甲基汞混合物的合成

7.2.2紫外可见光谱测定

7.3实验结果

7.4本章小结

第八章 总结和展望

参考文献

致谢

攻读硕士期间发表的学术论文及参加的学术会议

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著录项

  • 作者

    常洁;

  • 作者单位

    江苏大学;

  • 授予单位 江苏大学;
  • 学科 病理学与病理生理学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 陆荣柱;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R74R51;
  • 关键词

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