绿茶和茶多酚在肉鸡体内代谢及对血浆蛋白质的影响

摘要

本试验选择108只40日龄肉鸡为研究对象，按笼养饲养的方式进行，饲喂500 mg/kg 绿茶(green tea，GT)、300 mg/kg 茶多酚(tea polyphenols，TP)、300mg/kg表没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-epigallocatechin gallate，EGCG]。利用高效液相色谱(high-performance liquid chromatography，HPLC)、液质联用(liquid chromato-graphy in tandem mass spectrometry，LC-MS/MS)和凝胶电泳等方法，分析茶多酚及其代谢产物在鸡血和鸡粪中的变化，及茶多酚对鸡血浆蛋白质的影响。经分析，结果如下：
　　 1．经比色法和HPLC 方法分析，绿茶粉中总茶多酚的含量为19.17％，其中含2.22 mg/g 没食子酸(gallic acid，GA)、4.76 mg/g 没食子儿茶素[(-)-gallocatechin，GC]、22.63 mg/g表没食子儿茶素[(-)-epigallocatechin，EGC]、17.43 mg/g 儿茶素[(+)-catechin，C]、5.53 mg/g表儿茶素[(-)-epicatechin，EC]、53.52 mg/g EGCG、76 mg/g 没食子儿茶素没食子酸酯[(-)-gallocatechin gallate，GCG]，18.41 mg/g表儿茶素没食子酸酯[(-)-epicatechin gallate，ECG]。
　　 2．通过LC-MS/MS分析，在血浆中，灌喂绿茶组共鉴定出：焦性没食子酸(Pyrogallol acid，PA)、GC、(-)-5-(3',4’-二羟基苯基)-γ-戊内酯[(-)-5-(3',4’-dihydroxyphenyl)-γ-valerolactone，M6]、C、GCG、O-methyl-gallocatechin-O-glucuronides (O-Me-GC-O-GlcUA)、Epicatechin-glucuronides+H+（EC-GlcUA+H+)等7 种产物；灌喂TP组共鉴定出：PA、GC、M6、C、EGCG、O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+等7 种产物；灌喂EGCG组共鉴定出：EGCG、GCG、O-Me-GC-O-GlcUA等3 种产物。在鸡粪中，灌喂绿茶组共鉴定出：GA、O-methyl-catechin-O-sulphates (O-Me-C-O-S)、O-methyl-gallocatechin-O-sulphates(O-Me-GC-O-S)、EGCG、GCG、ECG、O-Mel-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+等8 种产物；灌喂TP组共鉴定出：GA、O-Me-C-O-S、O-Me-GC-O-S、EGCG、GCG、ECG等6 种产物；灌喂EGCG组共鉴定出：O-Me-C-O-S、EGCG、GCG、ECG等4 种产物。鸡血中主要是甲基化和葡萄糖酸化衍生物，而鸡粪中既有甲基化、葡萄糖酸化又有硫酸化衍生物。
　　 3．经HPLC分析。在鸡血中，灌喂绿茶组游离儿茶素GC、C 给药4h 时在血中最高浓度分别达到20.21μmol/L、76.99μmol/L，而游离儿茶素EGCG在给药8h 时最高浓度达到34.28μmol/L；灌喂TP组游离儿茶素GC、C 给药4h 时血中最高浓度分别40.35μmol/L、17.25μmol/L，游离儿茶素EGCG在给药4～
　　 8 时，在血浆中已代谢完；灌喂EGCG组，在给药0～1.5h 之间，游离儿茶素EGCG在血浆中分解成GCG，而在4～8h 之间在血浆中已代谢完。灌喂GT组衍生物O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+在给药4h 时在血液中最高浓度分别为1.13μmol/L、1.95μmol/L；灌喂TP组衍生物O-Me-GC-O-GlcUA、EC-GlcUA+H+在给药4h 时最高浓度分别达到1.71μmol/L、1.08μmol/L。对灌喂EGCG组，O-Me-GC-O-GlcUA在给药4h 浓度最大。灌喂GT组裂解物PA在给药4h 时在血中的浓度达到最大，M6在给药8h 时浓度达到最大。灌喂TP组PA在给药4h时在血液中浓度达到最大，M6在给药0~1.5h 时未检出。灌喂EGCG组0~8h 试验期间未检测到裂解物。
　　 4.鸡粪经HPLC分析。GA、EGCG、GCG、ECG在灌喂绿茶组和茶多酚组等4 种游离儿茶素都在4h 时排泄量最大；灌喂EGCG组游离儿茶素EGCG、ECG在给药4 时排泄量最大。GT组粪样中衍生物O-Me-GC-O-S 给药4h 排泄量最大，O-Me-C-O-S、O-Me-GC-O-GlcUA 给药1.5~4 时内全部排泄，EC-GlcUA+H+在给药4~8h 内排泄完；TP组粪样中衍生物O-Me-GC-O-S在给药4h 排泄量最大；EGCG组粪样中在给药0~8h 之间仅检测到1 种儿茶素代谢物：O-Me-C-O-S，且在给药4h 时排泄量最大。
　　 5.绿茶和茶多酚在1.5h 内均可以提高鸡血血浆总蛋白含量，其中以TP的作用最为明显。当饲喂后，时间超过4h，与对照组相比，GT组血浆总蛋白含量减少，TP组和EGCG组血浆蛋白含量显著提高。给药4-8h 内，与对照组相比，GT组和EGCG组血浆总蛋白含量显著降低，茶多酚对血浆总蛋白含量显著提高。
　　 6.灌喂1.5h后，TP 可使分子量为67.5kd的蛋白带加深，而EGCG 导致分子量为107.1kd 蛋白带消失；灌喂4h后，GT 可使分子量为58.9kd的蛋白带明显加深，EGCG 导致该蛋白带的消失；灌喂8h后，各组血浆中蛋白组分含量的变化均不明显。灌喂绿茶和茶多酚，时间在4h 之内，对血浆蛋白各组分含量造成影响较明显。

目录

文摘

英文文摘

声明

1 文献综述

2 引言

3 材料与方法

4 结果与分析

5 讨论

6 结论

参考文献

附录

致谢

个人简历

研究生期间发表的论文