六味地黄丸对肾上腺素诱导大鼠前脂肪细胞增殖、分化的作用及其部分药效物质研究

摘要

目的: 建立六味地黄丸中马钱苷、莫诺苷、芍药苷体内/体外分析方法；探讨六味地黄丸含药血清及其入血成分对肾上腺素诱导大鼠前脂肪细胞增殖、分化的影响。　　 方法:　　 一、采用高效液相色谱法对六味地黄丸中马钱苷、莫诺苷、芍药苷进行体内/体外分析。　　 二、原代培养大鼠皮下脂肪的前脂肪细胞，在其增殖与分化的不同阶段分别加肾上腺素、六味地黄丸含药血清及马钱苷、莫诺苷、芍药苷，以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测六味地黄丸含药血清及马钱苷、莫诺苷、芍药苷对肾上腺素诱导大鼠前脂肪细胞增殖的影响；以油红O染色法检测其对肾上腺素诱导大鼠前脂肪细胞分化过程中的细胞内脂肪积聚的影响。　　 结果:　　 一、建立了以高效液相色谱法为检测手段的马钱苷、莫诺苷和芍药苷的含量测定方法，此3成分在六味地黄丸中的含量分别为0.846±0.021mg/g、1.625±0.026mg/g、1.133±0.025mg/g。　　 二、初步确定了六味地黄丸含药血清中的3个原型入血苷类成分：马钱苷、莫诺苷、芍药苷。大鼠口服六味地黄丸1h后，此3成分在血清中的浓度分别为9.22±1.45μg/mL、6.81±1.35μg/mL、5.93±1.27μg/mL。　　 三、10μmoL/L肾上腺素促进大鼠前脂肪细胞的增殖，对其分化过程中的脂肪积聚有促分解作用。在一定浓度范围内，六味地黄丸含药血清及马钱苷、莫诺苷、芍药苷可增益肾上腺素对大鼠前脂肪细胞增殖的促进作用，但拮抗肾上腺素的促进脂肪分解的作用。　　 结论:　　 一、马钱苷、莫诺苷、芍药苷可能为六味地黄丸滋阴作用的药效成分。　　 二、六味地黄丸及3入血成分的作用机理之一可能是通过拮抗肾上腺素对前脂肪细胞分化的作用，从而改变细胞的反应性，以达到改善阴虚症状的目的。　　 三、复方入血成分分析与药理学研究相结合的方法，有助于阐明六味地黄丸的药效成分及作用机理。