黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮联合对奶山羊生产性能和血液代谢的影响

摘要

本论文研究了黄曲霉毒素B1（AFB1）、赭曲霉毒素A（OTA）和玉米赤霉烯酮（ZON）联合对奶山羊生产性能、血常规、血清生化指标、部分免疫和抗氧化指标的影响，同时进行AFB1血清代谢组学研究，为生产中多霉菌毒素的控制提供理论依据和参考。该研究主要从以下方面进行：
　　试验一：AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊生产性能和血液指标的影响。试验根据产奶量（1.36±0.4 kg/d）、泌乳天数（193±13d）、胎次（3.4±0.5）等相近的原则将50头泌乳后期崂山奶山羊随机分为5个处理组，每组10头，分别饲喂5种不同的处理日粮，即在基础日粮中分别添加0、50 ug/kg AFB1、50 ug/kg AFB1+100 ug/kg OTA、50 ug/kg AFB1+500 ug/kg ZON、50 ug/kg AFB1+100 ug/kgOTA+500 ug/kg ZON（干物质基础）。试验期21d，前7d为预饲期，后14d为正式期。结果表明，AFB1、OTA和ZON联合显著降低奶山羊的采食量（P<0.05）， AFB1+OTA组、AFB1+ZON组采食量低于对照组和AFB1组。AFB1、OTA和ZON联合以及 AFB1+OTA组产奶量与对照组相比显著降低（ P<0.05），AFB1+ZON组、AFB1组和对照组产奶量差异不显著（P>0.05）。饲喂不同毒素组合对体重影响不显著（P>0.05）。以上结果表明，AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊采食量和产奶量的影响最大，AFB1与 OTA联合对产奶量的影响程度比AFB1和ZON联合大。
　　饲喂不同组合的毒素，使血液RBC数量、MCV、MCH和MPV浓度极显著降低（P<0.01），WBC数量显著增加（P<0.01），MCHC有降低的趋势（P<0.1），对HGB、HCT和PLT浓度无显著影响（P>0.05）。AFB1+ZON组MCV、MCHC和MPV与AFB1+OTA+ZON组差异显著（P<0.05），与AFB1+OTA组差异不显著（P>0.05）。与对照组相比，AFB1+OTA+ZON组WBC数量和MCHC含量最低，RBC数量最高，AFB1和OTA联合对WBC、RBC和MCHC的影响程度高于AFB1和ZON的联合。结果表明，AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊血常规指标的影响最大。
　　饲喂毒素显著增加奶山羊血清GPT和TBIL含量（P<0.05），ALP含量有增加的趋势（P<0.1），但对CR、GLU、TC、TP和UERA含量影响不显著（P>0.05）。AFB1+OTA+ZON组GOT、GPT、ALP和TBIL含量显著增加（P<0.05），其他处理组间差异不显著，但AFB1+OTA组GOT、GPT、ALP和TBIL含量均高于AFB1+ZON组。结果表明，AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊血清生化指标的影响最大，对肝脏损伤最严重，AFB1与 OTA联合对肝损伤的程度比AFB1和ZON联合大。
　　饲喂毒素对血清IgG、IgM、IL-2和IL-4水平无显著影响（P>0.05）；IgA浓度显著下降（P<0.05）；IL-6浓度有增加的趋势（P<0.1）。AFB1+OTA组、AFB1+ZON组和AFB1+OTA+ZON组血清IgA差异不显著（P>0.05），但与对照组差异显著（P<0.05）；IgA浓度由高到低分别是AFB1+OTA+ZON组、AFB1+OTA组和AFB1+ZON组。AFB1+OTA+ZON组IL-6浓度与对照组和AFB1组相比显著增加（P<0.05）；AFB1+OTA组和AFB1+ZON组虽然差异不显著（P>0.05），但AFB1+OTA组IL-6浓度高于AFB1+ZON组。由此说明，AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊免疫能力下降的影响最大，AFB1与ZON联合对免疫能力下降的影响不如AFB1和OTA的联合。
　　奶山羊摄入不同组合的毒素，血清SOD活性下降极显著（P<0.01），GSH-Px活性显著降低（P<0.05），MDA浓度极显著升高（P<0.01），T-AOC活性有降低的趋势（P<0.1）。相比对照组，AFB1+OTA+ZON组和AFB1+OTA组SOD、GSH-Px、T-AOC活性显著降低（P<0.05），MDA含量显著增加（P<0.05），但AFB1+OTA+ZON组和AFB1+OTA组之间差异不显著（P>0.05）；AFB1+ZON组与对照组和AFB1组差异均不显著（P>0.05）。血清SOD、GSH-Px、T-AOC活性由低到高以及MDA含量由高到低分别是AFB1+OTA+ZON组、AFB1+OTA组、AFB1+ZON组和AFB1组，表明AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊抗氧化能力下降的影响最大，AFB1与OTA联合对抗氧化能力下降的影响比AFB1和ZON的联合大。
　　试验二：奶山羊AFB1对血清代谢组学研究。试验动物和试验设计与试验一相同。选择保存的试验第7d采集的对照组和AFB1组血清样品，每组10个，室温溶解。通过核磁共振扫描技术(NMR)分析AFB1组和对照组血清代谢物谱，主成分分析(PCA)和正交信号校正偏最小二乘法（OSC-PLS）对血清内源代谢物进行识别。结果发现，AFB1组血清脂蛋白、3-羟基丁酸酯、乙酸、亮氨酸和异亮氨酸、缬氨酸、乳酸和胆碱浓度显著降低（P<0.05），柠檬酸、葡萄糖、甜菜碱和甘氨酸浓度显著增加（P＜0.05）。结果表明，AFB1改变脂代谢、糖代谢和氨基酸代谢对奶山羊产生毒性。
　　综上所述，AFB1、OTA和ZON联合显著降低奶山羊的产奶量和采食量，改变血常规和血清生化指标，降低奶山羊的抗氧化和免疫能力，AFB1和OTA的联合作用强于AFB1和ZON的联合。因此，AFB1、OTA和ZON联合对奶山羊造成了负面影响，AFB1和OTA联合对奶山羊负面影响的程度大于AFB1和ZON的联合。AFB1通过改变脂代谢、糖代谢和氨基酸代谢对奶山羊产生毒性。

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文献综述

1 饲料霉菌毒素的污染情况

2 AFB1、OTA和ZON的单独毒性、联合毒性及其机制

3 多霉菌毒素对动物生产性能、血常规和生化指标、免疫和抗氧化能力的影响

4 代谢组学研究进展

试验一 黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A 和玉米赤霉烯酮联合对奶山羊生产性能和血液指标的影响

前言

1 材料和方法

2 试验结果

3 讨论

4 小结

试验二 奶山羊摄入黄曲霉毒素B1后血液代谢组学研究

前言

1 材料和方法

2 试验结果

3 讨论

4 小结

全文主要结论及尚待解决的问题

1 本文的主要结论

2 有待进一步研究的问题

参考文献

致谢

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